產品名稱：人神經趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒
英文名稱：Human fractalkine/neurotactin ELISA Kit
產品規格：48T/96T

人神經趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒組成:
試劑盒組成    96孔配置    48孔配置    備注
微孔酶標板    8孔×12條    8孔×6條    無
標準品    0.3mL×6管    0.3mL×6管    無
樣本稀釋液    6mL    3mL    無
檢測抗體-HRP    10mL    5mL    無
20×洗滌緩沖液    25mL    15mL    按說明書進行稀釋
底物A    6mL     3mL    無
底物B    6mL     3mL    無
終止液    6mL     3mL    無
封板膜    2張    2張    無
說明書    1份    1份    無
自封袋    1個    1個    無
 
備注：
1. 標準品濃度依次為：48、24、12、6、3、0 mg/L
2. 經過大量正常標本檢驗，標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內，實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過標準品濃度時，可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。
 
樣本處理及要求
1、血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2、血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3、細胞培養物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
注：標本溶血會影響*后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。
 
實驗需要而未提供的試劑和器材：
1、酶標儀（450nm）
2、高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3、37℃恒溫箱
4、蒸餾水或去離子水
 
試劑準備：
試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。
20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
 
人神經趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒操作步驟：
1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2、設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3、樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4、除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5、棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6、每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7、每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
 
注意事項
1、嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2、洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3、消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
4、底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經變藍的底物液不能使用。
5、避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6、在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7、平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8、任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9、不能使用過期產品。
10、如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好，按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。
 
實驗結果計算:
以所測標準品的OD值為橫坐標，標準品的濃度值為縱坐標，在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度。