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人T細胞生長因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)ELISA試劑盒說明書

2024-01-17 11:20 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產品名稱:人T細胞生長因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)Elisa試劑盒

英文名稱:Human T cell growth factor Ⅲ,TCGF-Ⅲ ELISA Kit

規格:96T/48T

檢測方法:酶聯免疫法/酶免法(ELISA)

待測樣本:血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等
用 途:用于定量檢測人血清、血漿及相關液體樣本中人T細胞生長因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)Elisa試劑盒的含量。

保存條件:2-8℃低溫保存

保質期:六個月

工作原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被T細胞生長因子-ⅢTCGF-Ⅲ抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的T細胞生長因子-ⅢTCGF-Ⅲ呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。


工作原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被T細胞生長因子-ⅢTCGF-Ⅲ抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的T細胞生長因子-ⅢTCGF-Ⅲ呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

使用方法
1、加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同) 、標準孔、待測樣品孔。 在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl, 待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣品*終稀釋度為 5 倍) 。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
2、配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
3、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。
4、加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
5、溫育:操作同 3。
6、 洗滌:操作同 5。
7、 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
8、 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色) 。
9、測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值) 。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。

注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
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