產品名稱：人Chemerin(RARRES2)ELISA試劑盒
英文名稱：Human Retinoic acid receptor responder protein 2 ELISA Kit
產品規格：96T

本試劑盒采用夾心法酶聯免疫吸附法，用于體外定量分析人血清、血漿、細胞裂解液或細胞培養上清中Chemerin的含量。預先包被的抗體和檢測相抗體都是Chemerin多克隆抗體。檢測抗體經生物素標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應；經過PBS或TBS的徹底洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Chemerin呈正相關。

Chemerin也稱TIG2或RARRES2，分子量為18KD。Chemerin基因在體內可以表達出一種具有低活性的復合蛋白，即前體prochemerin，經細胞外蛋白酶水解作用，prochemerin可以轉變為具有高活性的chemerin蛋白。Chemerin主要表達在白色脂肪組織、肝、卵巢等組織中。

檢測指標：Retinoic acid receptor responder protein 2；RARRES2；Chemerin；Tazarotene-induced gene 2 protein；TIG2
檢測范圍：780pg/ml～50ng/ml
特異性：系統與其他細胞因子無交叉反應
敏感性：＜5pg/ml

產品組成：

組分	規格	數量
預包被抗人Chemerin抗體的96孔板	96T	1板
重組人Chemerin標準品(凍干)	50ng/管	2管
生物素標記抗人Chemerin(100X)	130μl	1管
親和素-過氧化物酶復合物(ABC)(100X)	130μl	1管
樣品稀釋液	30ml	1瓶
抗體稀釋液	12ml	1瓶
ABC稀釋液	12ml	1瓶
TMB顯色液	10ml	1瓶
TMB終止液	10ml	1瓶
洗滌緩沖液(25X)	20ml	1瓶
封板膜		4張

儲存條件：2-8℃（頻繁使用時），-20℃（長時間不用時）。
有效期：6個月(4℃)；12個月（-20℃）。

參考標準曲線數據：(取自某一批次質檢數據，僅供參考，用戶需要自己建立標準曲線)

濃度(ng/ml)	0	0.78	1.56	3.12	6.25	12.5	25	50
OD值	0.008	0.349	0.577	0.854	1.079	1.315	1.459	1.639

操作步驟
1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照隨貨說明書中圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11.測定：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

計算
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。