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物質(zhì)的熒光強度與這些因素有關

2025-02-17 10:34 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
溫度增加,熒光強度下降(因為內(nèi)、外轉(zhuǎn)換增加、粘度或“剛性”降低)。因此體系降低溫度可增加熒光分析靈敏度。
影響熒光及強度的因素

1)躍遷類型:通常,具有π—π*及n—π*躍遷結(jié)構的分子才會產(chǎn)生熒光。而且具π—π*躍遷的量子效率比n—π*躍遷的要大得多(前者大、壽命短、kisc小)。

2)共軛效應:共軛度越大,熒光越強。

3)剛性結(jié)構:分子剛性(rigidity)越強,分子振動少,與其它分子碰撞失活的機率下降,熒光量子效率提高。如熒光素(φ大)與酚酞(φ=0);芴(φ=1)與聯(lián)苯(φ=0.18)。

4)取代基:①給電子取代基增強熒光(p-π共軛),如-oh、-or、-nh2、-cn、nr2等;②吸電子基降低熒光,如-cooh、-c=o、-no2、-no、-x等;③重原子降低熒光但增強磷光,如苯環(huán)被鹵素取代,從氟苯到碘苯,熒光逐漸減弱到消失,該現(xiàn)象也稱重原子效應。

5)溶劑效應:①溶劑極性可增加或降低熒光強度(改變π—π*及n—π*躍遷的能量);②與溶劑作用從而改變熒光物質(zhì)結(jié)構來增加或降低熒光強度。

6)溫度:溫度增加,熒光強度下降(因為內(nèi)、外轉(zhuǎn)換增加、粘度或“剛性”降低)。因此體系降低溫度可增加熒光分析靈敏度。

7)ph值:具酸或堿性基團的有機物質(zhì),在不同ph值時,其結(jié)構可能發(fā)生變化,因而熒光強度將發(fā)生改變;對無機熒光物質(zhì),因ph值會影響其穩(wěn)定性,因而也可使其熒光強度發(fā)生改變。

8)內(nèi)濾光和自吸:體系內(nèi)存在可以吸收熒光的物質(zhì),或熒光物質(zhì)的熒光短波長與激發(fā)光長波長有重疊,均可使熒光強度下降,稱為內(nèi)濾光;當熒光物質(zhì)濃度較大時,可吸收自身的熒光發(fā)射,稱為熒光自吸。

9)熒光猝滅:①碰撞猝滅;②靜態(tài)猝滅;③轉(zhuǎn)入三重態(tài)的猝滅;④電子轉(zhuǎn)移猝滅;⑤自猝滅。
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