新生牛血清樣品采集方法  新生牛血清的應用范圍

新生牛血清樣品采集方法

1、采集樣品前的準備事項

A、器具

a、器具的準備

保溫箱或保溫瓶，酒精棉，碘酒棉，棉簽、注射器及針頭(7×38，9×38,12×38，20×38等)。

b、輔助器材的準備

保溫箱、離心管、試管架、記號筆、自封袋，膠布、封口膜、封條、冰(暖)袋等。

B、防護安全用品

在給新生牛血清采集時，我們會要求采集者都應該注意防護安全，需要準備好口罩、乳膠手套、防護服、防護帽、膠靴等。

2、采集樣品進行時

A、操作步驟

a、由于新生牛屬比較小型體，所以我們只需將其穩定，使其頭部稍前伸并稍偏向對側。

b、對頸靜脈局部進行剪毛、消毒，在這過程中，我們最好要安撫新生牛的情緒，以免新生牛出現不適而亂動。

c、看清頸靜脈后，采血者用左手拇指(或食指與中指)在采血部位稍下方(近心端)壓迫靜脈血管，使之充盈、怒張。

d、右手持采血針頭，沿頸靜脈溝與皮膚呈45°角，迅速刺入皮膚及血管內，如見回血，即證明已刺入;使針頭后端靠血管內，如見回血，即證明已刺入;使針頭后端靠近皮膚，以減小其間的角度，近似平行地將針頭再伸入血管內1～2厘米。

e、放開壓迫脈管的左手，收集血液。采完后，以干棉球壓迫局部并拔出針頭，再以5%碘酊進行局部消毒。

B、注意事項

a、采血完畢，做好止血工作，即用干棉球壓迫采血部位止血，防止血流過多。

b、牛的皮膚較厚，頸靜脈采血刺入時應用力并瞬時刺入，見有血液流出后，將針頭送入采血管中，即可流出血液。

3、采集樣品成功后的保存及編號填寫

a、待樣品采集完畢后，我們應該要對其進行血樣編號填寫及保存，血樣采集后應立即進行編號，編號注意與被采畜禽一一對應。

b、編號規則：注明采集地區、養殖場名稱、動物種類(如采樣較多，可以一個養殖場一個自封袋，在自封袋上注明信息，在離心管上注明編號)。

c、保存方法：一般選用塑料泡沫箱存放血液或血清。采血后針頭向上扎進箱壁或放入離心管中存放；箱內放入冰塊或暖水袋，保證箱內20-25℃的室溫水平保存2小時以上即可析出血清；如果能在24小時內及時送樣可2-8℃冷藏保存，若不能及時送樣化驗需冷凍保存。

新生牛血清的應用范圍詳細介紹

新生牛血清的應用范圍

1、在說到新生牛血清的應用范圍前，我們需要先了解一下培養基與新生牛之間的關系，細胞培養基是培養環境中最重要的成分，由培養基和新生牛血清混合組成的完全培養基能夠提供細胞生長所必需的營養素、生長因子和激素，并能調節培養體系的 pH 值和滲透壓。

2、目前主要有兩種基本的細胞培養體系，一種是使細胞在人工基質上單層生長 ，即貼壁培養、微載體、片狀載體等培養方式)，另一種是使細胞在培養基中自由漂浮生長 即懸浮培養，其中包括全懸浮培養和需要借助載體的培養。

3、除造血細胞系和其他一些細胞外，大多數脊椎動物細胞均具有貼壁依賴性，必須在合適的基質上培養，且該基質必須經過特殊處理，以便細胞粘附和伸展 (即組織培養處理)。但是，許多細胞系也可采用懸浮培養。

4、由于新生牛血清在兩種培養體系中發揮的作用有所區別，如貼壁培養血清主要提供貼壁因子和營養物質，而懸浮培養則主要提供促細胞生長的因子；其主要的應用范圍一般來說，主要有以下這些！

5、新生牛血清在動物細胞懸浮培養的應用中依據細胞是否具有貼壁依賴性，分為動物細胞全懸浮細胞培養和動物細胞微載體懸浮培養；全懸浮細胞(如BHK21懸浮細胞株)可以在生物反應器中直接進行生產增殖，具有細胞自由生長、培養環境均一、取樣簡單、培養操作簡單可控、放大方便、污染率和成本低的特點。

6、貼壁細胞(ST、Vero細胞等)在生物反應器中懸浮培養時需要借助介質表面，通常是微載體，其細胞所能達到的濃度和生產產品的產量依賴于微載體提供的生長表面積；微載體為動物細胞生長提供了便利的表面，具有極大的培養表面積/體積比，它能夠實現細胞高密度培養，是目前貼壁動物細胞大規模培養使用的主要介質。

7、在懸浮培養中，生產抗體藥物的CHO細胞、生產流感(禽流感)疫苗的MDCK細胞等已經采用無血清培養；但在BHK21細胞全懸浮培養的口蹄疫疫苗生產中，牛血清仍然被廣泛使用。

8、在南美和印度，口蹄疫疫苗生產通常添加10%左右成牛血清，而國內企業采用低血清培養基彌補了基礎細胞培養基的不足；但是，牛血清中的一些促細胞生長的成分還是無法被替代，通常會在培養基中添加1%-3%的牛血清，同時它還起著調節培養液酸堿度的作用。

9、為使培養體系保持良好的混合狀態和分散性，從而提高細胞生長量，需對培養體系進行攪拌，這時培養基中的牛血清即可以降低細胞的機械損傷；總而言之，牛血清因有著細胞生長必須的營養成份，所以具有極為重要的功能。

10、主要用于原代細胞培養、傳代細胞培養及病毒疫苗的研制和生產；對培養中的細胞起到某些保護作用。

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