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細胞生長曲線的測定 這些問題你遇到過嗎?

2018-12-25 10:19 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
       細胞生長曲線是測定細胞絕對生長數的常用方法,也是判定細胞活力的重要指標,是培養細胞生物學特性的基本參數之一。一般細胞傳代之后,經過短暫的懸浮然后貼壁,隨后度過長短不同的潛伏期,即進入大量分裂的指數生長期。在細胞達到飽和密度后,停止生長,進入平頂期,然后退化衰亡。為了準確描述整個過程中細胞數目的動態變化,典型的生長曲線可分為生長緩慢的潛伏期,斜率較大的指數生長期,呈平臺狀的平頂期及退化衰亡4個部分。以存活細胞數(萬/mL)對培養時間(h或d)作圖,即得生長曲線。
1、 問:測定細胞生長曲線的意義是什么?

答:細胞生長曲線是測定細胞絕對生長數的常用方法,也是判定細胞活力的重要指標,是培養細胞生物學特性的基本參數。因為細胞太小,無法測單個細胞的生長狀態,所以測細胞群體的生長曲線。

2、 問:如何選擇細胞接種數?

答:可根據細胞傳代培養過程中接種數及細胞生長周期進行計算,細胞接種數因細胞的不同而不同。

3、細胞計數時為什么要用臺盼藍染色?

答:加入臺盼藍后,活細胞不著色,臺盼藍著色的細胞呈深藍色,是不健康或已死亡的細胞,不能計數。

4、細胞生長曲線測定時為什么要做重復孔?

答:測定細胞生長曲線細胞計數時選擇 3 個復孔,每孔分別計三次,取其平均值,目的是減小操作誤差。

5、細胞生長曲線測定周期是幾天?

答:一般是一個星期。

6、為什么繪制的細胞生長曲線沒有達到平臺期?

答:可能有以下原因:一是細胞接種密度過低;二是細胞培養時間過短;三是細胞生長狀態不好,使其不能正常增殖。

7、為什么細胞計數天,細胞數沒有增加反而減少?

答:一般細胞傳代后,會有一個生長緩慢的潛伏期,細胞不增殖,而細胞會有正常的死亡,故細胞數不增加反而減少。

8、細胞生長曲線還有其他方法繪制嗎?

答:當然有。我們提到*多的是直接計數的方法,除此以外還有相對計數的方法,該類方法首先要繪制標準曲線,標定細胞數和某個變量的函數關系,然后我們只需要測定每天這個變量的值便可以計算出細胞數。常用的是 MTT、CCK8 等比色的方法。

 

 

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