幾種常見的微生物酶類實驗
2019-03-15 17:20 作者：洛辰 來源：上海遠慕生物試劑
自然界中的很多微生物都具有產酶的特性，其中最常見的四種分別是過氧化氫酶、氧化酶、凝固酶和DNA酶。下面就這四種酶的檢驗方法做一下介紹。
1、過氧化氫酶實驗
很多細菌都可以產過氧化氫酶，過氧化氫酶能夠催化過氧化氫，釋放出氧氣，從而產生氣泡。檢驗方法是取3%過氧化氫溶液0.5ML,滴加于不含血液的細菌瓊脂培養基上，或者取1-3ML滴加到10ML的菌懸液中。如果培養物中出現氣泡則為陽性。做過氧化氫酶實驗時要注意以下幾點：1、細菌要新鮮。2因為紅細胞中含有過氧化氫酶，可能出現假陽性，所以不能用血瓊脂平板做過氧化氫酶實驗。
2、氧化酶實驗
具有氧化酶的細菌，能夠氧化對苯二胺，生成有色的醌類化合物。檢驗方法是取潔凈的濾紙一小塊，涂抹菌苔少許，滴加一滴10g/L對苯二胺溶液于菌落上，觀察顏色變化。如果立即呈粉紅色并迅速轉為紫紅色者為陽性。做該類實驗應注意不能采用在含葡萄糖培養基上生長的菌落，因為葡萄糖發酵可抑制氧化酶的活性。
3、凝固酶實驗
金黃色葡萄球菌可產生游離的凝固酶，從而使血漿凝固。檢驗方法是取兩支試管，分別加入0.5ML血漿（可適當稀釋），挑取菌落加入到試管中，用已知的陽性菌株作為對照，37攝氏度下水浴3-4小時。血漿凝固者為陽性。
4、DNA酶實驗
某些細菌可產胞外DNA酶，DNA酶可以水解DNA長鏈，形成的寡核苷酸可溶于酸，當在菌落平板上加入酸后，若在菌落周圍出現透明環，則表明該菌具有DNA酶。檢測方法是將待檢菌落點狀接種于DNA瓊脂平板上，35攝氏度培養18-24小時，在細菌生長物上加一層1MOL/L鹽酸(使菌落浸沒），如果菌落周圍出現透明環則為陽性，無透明環為陰性。需注意的是革蘭氏陽性菌中只有金黃色葡萄球菌可產生DNA酶，因此此方法可用來鑒定金黃色葡萄球菌。
![雙[三(羥甲基)氨基甲烷],CAS:6976-37-0](http://struc.chem960.com/strucimg/7000/ctzw0nzi34oyob9fnlmhiwee.png)
