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巴氏染色液(Papanicolaou EA36)說用說明書

2019-04-23 9:20 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
簡介:
細胞學常規染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法。Papanicolaou?Stain?最初僅用于檢測陰道上皮雌激素水平以及生殖道念珠菌、滴蟲等病原體。橘黃G6與EA36或EA50聯合使用,可將胞漿染成顏色鮮明的綠色、藍色和粉色。目前大多數實驗室采用成品染液,所以每種染液應注意其改良后的最佳條件。最終胞漿染色應透明可見,核染色質應很容易辨別出來。目前改良的巴氏染色液含有多種離子,具有多色性染色效能。染色后胞質鮮艷、透明性好以及核膜、核仁、染色質結構清晰。細胞核染色液主要為Harris蘇木素染液,細胞質染色液主要為EA36染液、EA50染液。巴氏染色液用于細胞脫落標本,細胞核呈藍色或黑色,角化鱗狀細胞胞漿呈粉紅或橘紅色。
Leagene巴氏染色液(Papanicolaou?EA50)細胞質染色采用EA50染色液,細胞核染色采用Leagene自主研發的無毒改良型蘇木素染色液,不僅適用于婦科細胞學涂片染色如篩查宮頸癌和癌前病變,也適用于胸水、腹水、痰液等非婦科細胞樣本的染色。
 
信息說明】
  產品名稱:巴氏染色液(Papanicolaou EA36)
  供應商:遠慕染色液廠家
  規格:4×100ml/4×500ml
  分類:細胞染色
  儲存條件:室溫,避光,6個月
  用途:細胞學樣本常規染色,尤其適用于婦科細胞學涂片染色、細胞脫落標本染色。
  注意事項:巴氏染色液是用蘇木素、橙黃、伊紅、磷鎢酸、亮綠等配制而成;用于處理分泌物等細胞脫落標本,細胞核呈藍色或黑色,角化鱗狀細胞胞漿呈粉紅或橘紅色。
 
  【簡介說明】
  細胞核染色液主要為Harris蘇木素染液,細胞質染色液主要為EA36染液、EA50染液;巴氏染色液用于細胞脫落標本,細胞核呈藍色或黑色,角化鱗狀細胞漿呈粉紅或橘紅色。
  細胞學常規染色普遍使用巴氏(Papanicolaou)法;Papanicolaou Stain最初僅用于檢測陰道上皮雌激素水平以及生殖道念珠菌、滴蟲等病原體。
  目前大多數實驗采用成品染液,所以每種染液應注意其改良后的最佳條件;最終胞漿染色應透明可見,核染色質應很容易辨別出來;目前改良的巴氏染色液含有多種離子,具有多色性染色效能。
 
  【自備材料】
  1、固定液(如95%乙醇-冰乙酸固定液)
  2、系列乙醇
  3、顯微鏡
  4、鹽酸乙醇分化液
 
  【染色原理】
  巴氏染色液(Papanicolaou EA36)細胞質染色采用EA36染色液,細胞核染色采用Jimei自主研發的無毒改良型蘇木素染色液,EA36比EA50更適用于婦科細胞學涂片染色篩查宮頸癌和癌前病變;染色后胞質鮮艷、透明性好以及核膜、核仁、染色質結構清晰。
 
  【染色結果】
  細胞核:藍紫色或黑色
  非角化細胞的胞質:淡藍色或淡綠色
  角化細胞的胞質:粉紅或橘紅色
 
  【組成說明】
  試劑(A):Jimei蘇木素染色液: 規格:4×100ml/4×500ml,保存:RT避光
  試劑(B):藍化液:規格:4×100ml/4×500ml,保存:RT
  試劑(C):橘黃G6染色液:規格:4×100ml/4×500ml,保存:RT
  試劑(D):EA36染色液: 規格:4×100ml/4×500ml,保存:RT避光
  使用說明書 :1份
 
  【操作流程】
  1、細胞涂片用95%乙醇-冰乙酸固定液固定10~15min。
  2、95%的乙醇浸泡1min。
  3、80%的乙醇浸泡1min。
  4、70%的乙醇浸泡1min。
  5、蒸餾水或自來水浸泡或沖洗1min。
  6、Jimei蘇木素染液染色5~10 min。
  7、自來水沖洗2 min。
  8、1%的鹽酸乙醇分化液分化約4~5s或0.5%鹽酸水溶液分化10s。
  9、自來水沖洗2 min。
  10、藍化液中藍化2 min。
  11、自來水沖洗2 min。
  12、70%的乙醇脫水2min。
  13、80%的乙醇脫水2min。
  14、95%的乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)脫水各2min。
  15、橘黃G6染液染色2min。
  16、95%的乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)沖洗各2min。
  17、EA36染色液染色3~5min。
  18、95%的乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)脫水各1min。
  19、無水乙醇(Ⅰ)、(Ⅱ)脫水各1min。
20、二甲苯透明、中性樹脂封片。
 
注:
  1. 因蘇木素上有結晶下有沉淀,使用前應用濾紙過濾一遍。染色時要輕拿輕放。蘇木素染液在染夠1500~2000張玻片的情況下更換新的染液。蘇木素的染色時間隨氣溫和染料情況而酌情改變。
  2. 鹽酸分化的作用為分化掉胞漿上沾上的蘇木素,因此時間不宜長。但如果分化不夠,會造成細胞核顏色過深或(及)胞漿很難上色。.分化后立即放入自來水中沖洗。不宜久置,否則可使全部顏色消失。
  3. 堿化亦稱返藍過程,返藍偏短,蘇木色精形成不充分,從而影響染色效果。碳酸鋰每缸過500張玻片更新;溫水更換德頻率當更高。
  4. 橘黃染色時間不宜過長,否則EA50不易上色。橘黃每缸過500張玻片更新。
  5. EA50使用前要充分攪拌,染色過程中提拿、旋轉染色架數詞。每缸過500~800張玻片后更新。
  6. 技術人員操作要流暢,動作干凈利落,不可把上一缸德染色液帶入下一缸,每缸交替時要甩干玻片上殘存德液體。
  橘黃液之前的第一缸酒精每過6架更新一瓶;橘黃液之后的第一缸每過6架更新一瓶;每過6架之后更新第一缸無水酒精,并順次向前。
 
  【注意事項】
  1、所有染液均需過濾,需經常更換染液。
  2、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
  3、請嚴格按照巴氏染色液(Papanicolaou EA36)說明書上的要求進行規范化操作。
 
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