胎牛血清采用健康母牛懷孕的八月齡胎牛血液為原料，經(jīng)無菌采集、分離、微孔過濾后而成。本產(chǎn)品無支原體、無牛病毒、無噬毒體、內(nèi)毒素含量低于1EU／ml，適用于細(xì)胞、組織器官培養(yǎng)、細(xì)胞株保藏、單抗研制，是醫(yī)院、科研院校、動(dòng)物疫苗、

血清的質(zhì)量要求

隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和生活水平的不斷提高對(duì)生物醫(yī)藥產(chǎn)品的質(zhì)量要求也越來越高，所以對(duì)制備工藝中所涉及到的各種原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求也越來越高，特別是對(duì)用于細(xì)胞培養(yǎng)基中的主要天然成份――牛血清的質(zhì)量要求也不斷提高。牛血清包括胎牛血清、新生牛血清和成牛血清。

一、WHO公布的《用動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品規(guī)程》中的要求：

1. 牛血清必須來自有文件證明無牛海綿狀腦病的牛群或國家。并應(yīng)具備適當(dāng)?shù)谋O(jiān)測(cè)系統(tǒng)。

2.有些國家還要求牛血清來自未用過反芻動(dòng)物蛋白飼料的牛群。

3.證明所用牛血清中不含對(duì)所生產(chǎn)疫苗病毒的抑制物。

4.血清要通過濾膜過濾除菌，保證無菌。

5.無細(xì)菌、霉菌、支原體和病毒的污染，有些國家要求無細(xì)菌噬菌體污染。

6.對(duì)細(xì)胞有良好的支持繁殖作用。

二、我國在對(duì)牛血清的質(zhì)量2000年版《中國生物制品主要原輔料質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)》中提出比較嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)要求。

包括蛋白質(zhì)含量，細(xì)菌、真菌、支原體、牛病毒、大腸桿菌噬菌體、細(xì)菌內(nèi)毒素，支持細(xì)胞增殖檢查。

三、美國對(duì)牛血清的質(zhì)量要求：

Gibco 和Sigma二家主要的美國牛血清供應(yīng)商的牛血清都已進(jìn)入到我國市場(chǎng)，他們對(duì)其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求都極為嚴(yán)格，從血清來源到產(chǎn)品質(zhì)量都有明確規(guī)定。

1） 血清來源：可從世界各國收集胎牛血清，但是必須符合他的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和美國農(nóng)業(yè)部進(jìn)口要求。地方當(dāng)局還不清楚本地是否有牛海綿狀病毒流行的血清不收集，有說明血清質(zhì)量的證明資料：包括收集過程的全部資料、檢驗(yàn)結(jié)果和交付情況。

2）血清的收集：胎牛血清是心臟穿刺取血，新生牛（10～14天）和小牛（10個(gè)月內(nèi)）血清靜脈取血。血清采集條件必須符合工業(yè)生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)：低溫下采集、一次分離、分離后立即混合凍存。符合要求的血清56℃水浴30分鐘滅活。

3）血清的制備：

a. 超低IgG胎牛血清：通過親和層析工藝去除胎牛血清中的γ球蛋白，使FBS γ球蛋白含量減到zui低，一般IgG≤5ug/ml，生物學(xué)活性不變.

b. 血清透析：用12000～14000分子量的透析膜在0.15M NaCl中透析直到使葡萄糖含量＜0.5mg/ml（用葡萄糖氧化酶／過氧化酶方法測(cè)定）。

c. γ－射線照射：已經(jīng)證明γ－射線照射可以有效滅活血清中可能污染的病毒、支原體。照射劑量為30～45KG。而且這個(gè)劑量的γ－射線照射不會(huì)改變血清的理化性質(zhì)和對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的影響。

4）除菌過濾:經(jīng)過上述處理的粗制血清再經(jīng)過一系列除菌濾膜過濾包括0.2微米（micron）和0.1微米濾膜。FBS要通過三層0.1微米濾膜，其他血清可通過0.2微米濾膜。

四、終產(chǎn)品血清質(zhì)量

1）化學(xué)檢定：滲透壓pH

蛋白含量――電泳法

2） 微生物學(xué)檢查：細(xì)菌、真菌符合USP標(biāo)準(zhǔn)。

支原體：在支原體專業(yè)培養(yǎng)基上培養(yǎng)了3～4周，培養(yǎng)溫度36℃±2℃

分別在需氧和厭氧條件下進(jìn)行，有的還需要在支原體瓊脂培養(yǎng)皿上傳4次，Hoechst熒光素DNA染色檢查那些培養(yǎng)法無法檢出的支原體如豬鼻支原體等。

3）內(nèi)毒素檢測(cè)

用鱟試劑檢查。

4）細(xì)菌噬菌體檢查

主要檢查E.Coli（C300 or K-12）噬菌體。

5）激素含量測(cè)定

每批FBS對(duì)某些激素含量都要進(jìn)行測(cè)定，包括：雌二醇、胰島素、孕硐、睪wan素、甲狀腺素等。

6）血紅蛋白檢測(cè)

血紅蛋白與氧合血紅蛋白的比≥70％，血紅蛋白含量≤mg15/dl。

7）細(xì)胞生長效果測(cè)定

細(xì)胞克隆效果測(cè)定，細(xì)胞選擇：Sp20/Ag-14 或P3X63-Ag8.653。

五、正確保存

保存血清zui好的方法是什么？ 血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。但是，若存放于 4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶，建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。反復(fù)凍融會(huì)對(duì)血清的品質(zhì)造成不良影響。