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遠慕告訴您:如何讓細胞乖乖沉睡或滿血復活

2019-08-22 10:56 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑

養細胞時期的小編,
常常希望自帶一股開gua神力,
保護好嬌弱的細胞,拯救慘不忍睹的實驗!
如同《星球大戰》里擁有 ”原力光環“的主角們,
可以隔空移物,手接閃電,最hou拯救世界!
小編至今疑惑“原力”到底是什么?
“ I am one with the force ,
and the force is with me.”
翻譯過來比較玄,很像中國武俠小說的內力~
“ 我與原力同在,原力與細胞同在
凍存的細胞,滿血復活吧! ”


回 到 現 實
經常有用戶反映“細胞凍存與復蘇遇到了問題”
“如何握住原力,讓你的細胞乖乖沉睡又滿血復活?”

 

遠慕生物的老司機為此做了以下總結:

選 好 細 胞 凍 存 液 是 基 礎

使用動物血清常常會遇到很多問題,例如:病毒感染、其他動物源的污染。使用無血清制品培養與凍存細胞,可以消除這方面的隱患。此外,無血清凍存液可以確保細胞在化學成分固定的條件下生長,更進一步確保細胞凍存時的條件穩定。

 

慢 慢 做 冷 凍

若您養的是貼壁細胞,請先將細胞消化下來;若是懸浮細胞,請直接按以下步驟進行:
1. 以200-300g離心3分鐘,棄去上清,收集細胞。
2. 用無血清凍存液將細胞重懸(不需回溫),將細胞密度調整為3~5x106 cells/ml,添加到凍存管中(一般每管1ml)。
3. 建議將含有細胞懸液的凍存管放進漸進降溫盒或是保溫杯中,置于-80°C冰箱6小時以上或是過夜(或不需要程序降溫)。
4. 將凍存管迅速移到液態氮中保存。
5. 凍存24小時后,建議檢測細胞存活率。

 

細 胞 復 蘇 要 迅 速

1. 將細胞凍存管由液態氮中取出,置于室溫回溫,不用水浴溶解。此時可準備新鮮培養 基、無菌15ml離心管、培養瓶。
2. 在生物安全柜內,直接以少量培養基反復沖融,使細胞團塊化凍。
3. 先在無菌15ml離心管中加入5ml培養基,再將化凍的細胞懸液加入離心管中。以200~300g,3分鐘離心收集細胞。
4. 倒去上清液,重懸細胞,移到培養瓶中培養。

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