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遠慕生物:生化試劑之常用試劑配置

2019-11-08 10:15 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
導讀:生物研究中有很多試劑都很常用,并且配置起來比較簡單;本文講述的是生物化學中實驗用常用試劑的配置,歡迎大家參考。

1、0.5mol/L氫氧化鈉溶液  
組份濃度 0.5mol/L     ;配制量 2L  
配置方法 1.準確稱取氫氧化鈉40g。

2.用去離子水溶解并稀釋至2L。  2、0.5mol/L鹽酸溶液  
組份濃度 0.5mol/L     ;配制量 2L  
配置方法 1.準確量取鹽酸83.4mL。 2.用去離子水稀釋至2L。 


3、含 0.5mol/L氯化鈉的 0.5mol/L氫氧化鈉溶液  
組份濃度 0.5mol/L氯化鈉、0.5mol/L氫氧化鈉   ;配制量 1L  
配置方法 1.準確量取氯化鈉29.3g。 2.準確量取氫氧化鈉20g。 3.用去離子水稀釋至1L。 注意:此溶液供回收纖維素時使用。 


4、0.2%葡萄糖標準溶液  
組份濃度 0.2% ;配制量 1L  
配置方法 1.稱取葡萄糖2.5g置于稱量瓶中,在70℃干燥2小時。 2.干燥器中冷卻至室溫,重復干燥,冷卻至恒重。 3.準確稱取葡萄糖2.000g。 4.用去離子水溶解并定容至1L 5.于4℃保存。 


5、250μg/mL牛血清白蛋白標準液  組份濃度 250μg/mL ;配制量 2L  
配置方法 1.準確稱取250mg標準牛血清白蛋白。 2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸緩沖液溶解并定容至1L。 3.4℃保存。 


6、Folin試劑甲  
配置方法 1.稱取10g氫氧化鈉溶于400mL去離子水中,加入50g無水碳酸鈉,溶解,待用。2.稱取0.5g酒石酸鉀鈉,溶于80mL去離子水中,加入0.25g硫酸銅?5水,溶解。3.將1:2:去離子水按20:4:1的比例混合即可。 4. 4℃保存,可用一周。  


7、Folin試劑乙  配置方法: 
 
1.在500mL的磨口回流裝置內加入鎢酸鈉?2水25.0359g, 鉬酸鈉?2水6.2526g,去離子水175mL,85%磷酸12.5mL, 濃鹽酸25mL,充分混合。 
 
2.回流10小時,再加硫酸鋰37.5g,去離子水12.5mL及數滴溴。  

3.然后開口沸騰15min,以驅除過量的溴,冷卻后定容到250mL。
  
4.于棕色瓶中保存,可使用多年。

注意:上述制備的Folin試劑乙的貯備液濃度一般在2mol/L左右,幾種操作方案都是把Folin試劑乙稀釋至1mol/L的 濃度作為應用液,我們這時是把貯備液于使用前稀釋18 倍,使之濃度為0.1mol/L略高。這種稀釋18倍后的Folin 試劑乙就是上文稱之為的“應用液”。Folin試劑乙貯備 液濃度的標定,一般是以酚酞為指示劑。用Folin試劑乙去滴定1mol/L左右的標準氫氧化鈉溶液,當溶液顏色由紅變為紫灰,再突然變成墨綠即為終點,如果用氫氧化鈉去滴定Folin試劑乙,終點不太好掌握,溶液地顏色是由淺黃變為淺綠,再變為灰紫色為終點。 
 

8、DNS試劑 (3,5-二硝基水楊酸試劑)  
配置方法 1.取3,5-二硝基水楊酸10g,加入2mol/L氫氧化鈉溶液200mL。2.將3,5-二硝基水楊酸溶解,然后加入酒石酸鉀鈉300g。 3. 待其完全溶解,用去離子水稀釋至2000mL,棕色瓶保存。

9、5%蔗糖溶液  
組份濃度 5% ;配制量 1L  
配置方法 稱取蔗糖50g,用去離子水溶解定容至1L。

10、0.1mol/L蔗糖溶液  
組份濃度 0.1mol/L ;配制量 1L  
配置方法 稱取蔗糖34.230g,用去離子水溶解并定容至1L。 

11、20%乙酸溶液  
組份濃度 20% ;配制量 1.2L  
配置方法 量取冰乙酸300mL,用去離子水稀釋至1200mL。


12、30%(W/V)Acrylamide  
組份濃度 30%(W/V)Acrylamide 0.05% ;配制量 1L  
配置方法 1.稱量下列試劑,置于1L燒杯中 Acrylamide 290g 、BIS 10g 2.向燒杯中加入約600mL的去離子水,充分攪拌溶解 3.加入去離子水將溶液定容至1L,用0.45μm濾膜濾去雜質。 4.于棕色瓶中4℃保存。 注意:丙稀銑胺具有很強的神經毒性,并可通過皮膚吸收,其作用有積累性,配制時應戴手套等。聚丙烯酰胺無毒,但也應謹慎操作,因為有可能含有少量的未聚合成份。


13、40%(W/V)Acrylamide  
組份濃度 40%(W/V)Acrylamide 0.05% ;配制量 1L  
配置方法 1.稱量下列試劑,置于1L燒杯中 Acrylamide 380g、BIS 20g  2.向燒杯中加入約600mL的去離子水,充分攪拌溶解 3.加入去離子水將溶液定容至1L,用0.45μm濾膜濾去雜質。 4.于棕色瓶中4℃保存。  
     注意:丙稀銑胺具有很強的神經毒性,并可通過皮膚吸收, 其作用有積累性,配制時應戴手套等。聚丙烯酰胺無毒,但也應謹慎操作,因為有可能含有少量的未聚合成份。 


14、10%(W/V)過硫酸銨  
組份濃度 10%(W/V)過硫酸銨;   配制量 10mL  
配置方法 1.稱取1g過硫酸銨。 2.加入10mL的去離子水后攪拌溶解。 3.貯存于4℃。 注意:10%過硫酸胺溶液在4℃保存時間可使用2周左右,超過期限會失去催化作用。 


15、考馬斯亮藍R-250染色液 
組份濃度 0.1%(W/V)考馬斯亮藍R-250,25%(V/V)異丙醇, 10%(V/V)冰醋酸  配制量 1L  
配置方法 1.稱取1g考馬斯亮藍R-250,置于1L燒杯中。 2.量取250mL的異丙醇加入上述燒杯中,攪拌溶解。 3.加入100mL的冰乙醋酸,均勻攪拌。 4.加入650mL的去離子水,均勻攪拌。 5.用濾紙出去顆粒物質后,室溫保存。 


16、考馬斯亮藍染色脫色液  
組份濃度 10%(V/V)醋酸,5%(V/V)乙醇     ;配制量 1L  
配置方法 1.量取下列溶液,置于1L燒杯中。 醋酸100mL、 乙醇50mL 、H2O850mL 2.充分混合后使用。

17、凝膠固定液 (SDS-PAGE銀氨染色用)  
組份濃度 50%(V/V)甲醇,10%(V/V)醋酸     ;配制量 100L  
配置方法 1.量取下列溶液,置于1L燒杯中。 甲醇500mL 、醋酸 100mL 、H2O 400mL 2.均勻混合后室溫保存。 


18、凝膠處理液 (SDS-PAGE銀氨染色用)  
組份濃度 50%(V/V)甲醇,10%(V/V)戊二醛     ;配制量 1L  
配置方法 1.量取下列溶液,置于1L燒杯中。 甲醇50mL 、 戊二醛 10mL 、H2O 40mL 2. 均勻混合后室溫保存。 


19、凝膠染色液 (SDS-PAGE銀氨染色用)  
組份濃度 0.4%(W/V)硝酸銀,1%(V/V)濃氨水,0.04%(W/V)氫氧化鈉 ;配制量 100L  配置方法:1.量取下列試劑,加入100~200mL試劑瓶中。 20%硝酸銀 2mL  
濃氨水 1mL 4%氫氧化鈉 1mL H2O 96mL 2.均勻混合。該溶液應為無色透明狀。如氨水濃度過低時溶液會呈現混濁狀,此時應補加濃氨水,直至透明。  3.本染色液應現用現配,不宜保存。


20、顯影液 (SDS-PAGE銀氨染色用)  
組份濃度 0.005%(V/V)檸檬酸,0.02%(V/V)甲醛     ;配制量 1L  配置方法 1.稱取下列試劑,置于1L試劑瓶中。 檸檬酸 50mg 甲醛 0.2mL  2.加入1L去離子水后,搖動混合后溶解。 3.室溫保存。 

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