微生物培養基使用中常出現的問題及解答

    1、培養基煮沸溶解后再高壓滅菌，還是直接高壓滅菌存在疑惑。拿麥康凱瓊脂舉個例子，溶解后滅菌，平板上沒有不溶的結晶紫，沒有紫色的斑點；相對比未溶解滅菌的，平板上有結晶紫和紫色的斑點。所以正確的做法是先煮沸溶解后再高壓滅菌。

    2、培養基PH值為什么不在標準范圍內？

    其實出現這個情況的問題有很多種，大致我分為這么6大點：質量不好（生產廠家出廠時PH就不正確）滅菌問題（高壓滅菌溫度過高或滅菌時間過長，導致葡萄糖類焦化從而PH降低）保存時間（超過保質期或結塊）水質出現問題（可以用去離子水、純化水、蒸餾水不能用礦泉水、自來水）保存溫度（保存溫度過高）光線直射 總結本人認為以上6點都可能導致培養基PH出現偏差，如果出現此類問題，建議逐一排查，直到問題解決

    3、培養基高壓滅菌時為什么會焦化？

    不少檢驗人員在實驗時，發現經過滅菌的培養基有焦化現象，我認為引起此現象的主要原因有以下4點：可能你滅菌的時候溫度超過了121（正常115-11620min即可）滅菌時間過長培養基在容器中裝的太多（不要超過容器容量的80%）滅完菌的培養基在高溫環境中保存的時間過長，這些都會導致培養基發生焦化現象

    4、培養基PH怎么測定？

    通常分兩種情況：對于無需高壓滅菌的培養基，先煮沸溶解后再冷卻至25時，測定其PH值（固體培養基至少測2個點，取其平均值）對于需要高壓滅菌的培養基，高壓滅菌后，冷卻至25測其PH（固體培養基至少測2個點，取其平均值）

    5、含瓊脂培養基在倒平板為什么有時候不凝固或凝固不好？

    針對以上情況，我做了分析：針對需要高壓滅菌的培養基，倒平板時候要先搖勻（因為瓊脂分子量比較大，在冷卻過程中容易沉淀到底部，導致瓊脂分散不均勻）針對無需高壓滅菌的培養基，一次煮沸溶解后不能直接倒平板，應重復煮沸溶解3-5次（因為一次不能確保瓊脂完全溶解）

    6、為什么同一品牌的不同批號，粉末顏色有差別？

    分析可能有3個原因：此培養基成分含有染料或指示劑不同批次粉末培養基含水量不同，一般要求≤6%，含水量越高，顏色越深加工時球磨時間越長顏色越深

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    培養基PH值不在標準范圍內的原因：

    1、質量不好（生產廠家出廠時PH就不正確。

    2、滅菌問題（高壓滅菌溫度過高或滅菌時間過長，導致葡萄糖類焦化從而PH降低）。

    3、保存時間（超過保質期或結塊）。

    4、水質出現問題（可以用去離子水、純化水、蒸餾水不能用礦泉水、自來水）。

    5、保存溫度（保存溫度過高）。

    6、光線直射 。