黏液HID-AB染色液操作步驟
2021-06-11 15:21 作者:洛辰 來(lái)源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
中文名稱(chēng):黏液HID-AB染色液
產(chǎn)品規(guī)格:3×50mL|3×100mL
用途:又稱(chēng)高鐵二胺-阿利新藍(lán)染色液,可以染色酸性黏蛋白、蛋白多糖、透明質(zhì)酸等物質(zhì),可以區(qū)分硫黏蛋白和蛋白多糖。
注意事項(xiàng):主要由高鐵二胺溶液,Alcian 染色液等組成。染色結(jié)果為:酸性黏蛋白(硫酸化酸性黏液物質(zhì))呈棕紫色至棕黑色羧基化酸性黏液物質(zhì)(蛋白多糖、透明質(zhì)酸)呈藍(lán)色,細(xì)胞核呈紅色。
儲(chǔ)存條件:4℃,避光,6個(gè)月
黏液HID-AB染色原理在于高鐵二胺鹽中的二銨鹽與硫酸化酸性黏液物質(zhì)結(jié)合,形成復(fù)合物而被顯色。在pH值大大低于2.5時(shí),組織內(nèi)的硫酸根電離,帶有一個(gè)負(fù)電荷,與阿利新藍(lán)中的陽(yáng)離子形成鹽鍵,使帶有硫酸根的組織(如硫酸黏液物質(zhì))染色,硫酸化酸性黏液物質(zhì)等形成棕紫色至棕黑色。在黏液HID-AB染色液主要用于鑒別硫酸化酸性黏液物質(zhì)和唾液酸性粘液物質(zhì),小腸上皮產(chǎn)生氮乙酰化唾液酸性黏液物質(zhì),大腸上皮產(chǎn)生氧乙酰化唾液酸性黏液物質(zhì)和硫酸化酸性黏液物質(zhì)。該法可配合AB-PAS染色,對(duì)腸上皮化生的類(lèi)型進(jìn)行鑒定,對(duì)轉(zhuǎn)移性腫瘤發(fā)生黏液的類(lèi)型進(jìn)行鑒定。
操作步驟(僅供參考):
1、切片脫蠟至蒸餾水。
2、入配制好的HIDSolution浸泡12-24h(20~25℃)。
3、流水沖洗5min。
4、入Alcian染色液染色10-20min。
5、稍水洗。
6、入核固紅染色液復(fù)染10min。
7、流水沖洗1min。
8、梯度乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹(shù)膠封片。
染色結(jié)果:硫酸化酸性黏液物質(zhì)(如硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白) 棕紫色至棕黑色
羧基化蛋白酸性黏液物質(zhì)(如蛋白多糖和透明質(zhì)酸) 藍(lán)色
細(xì)胞 核紅色
注意事項(xiàng):
1、固定液采用10%中性福爾馬林。
2、HIDSolution不宜提前配制。用后可存儲(chǔ)于4℃,仍可用1~2次,但特異性不佳。
3、HIDSolution對(duì)人體有一定損害,請(qǐng)小心操作,避免接觸人體皮膚。
4、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。