產品名稱：Delafield蘇木素染色液
規格：100ml 500ml
分類：HE染色
儲存條件：避光，24個月
用途：常規切片
注意事項：屬于明礬蘇木素的一種,自然氧化3個月成熟,成熟后為深黑色,存儲太久后,使用時應過濾,染色時間一般15-20分鐘。


簡介：蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯合染色簡稱HE染色，是病理學和組織學最常用的一種染色方法。蘇木精為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內染色質的主要成分是DNA，在DNA的雙螺旋結構中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木素成熟的方法有自然氧化法、化學氧化法。自然氧化是指暴露于光和空氣中，這個過程比較緩慢，約需3～6個月不等，但生成物染色能力可維持很長時間。Ehrlich和Delafield蘇木素就屬于這種。

Delafield蘇木素染液非常穩定，成熟后密封可保存2年。對核染色質染得很清晰細致，染色時間也稍長。適用于教學和科研上的制片染色，用此染色液對冷凍切片染色則不理想。

染色原理：
1、細胞核染色的原理：蘇木素為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內染色質的成分主要是DNA，在DNA雙螺旋結構中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。

2、細胞漿染色的原理：伊紅是一種化學合成的酸性染料，在一定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質，為兩性化合物，細胞漿的染色與染液的pH值密切相關。當染色液pH值在胞漿蛋白質等電點(4.7～5.0)以下時，胞漿蛋白質以堿式電離，則細胞漿帶正電荷，就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子，與胞漿蛋白質帶正電荷的陽離子結合，使細胞漿著色，呈現紅色。

3、分化作用：染色后，用某些特定的溶液將組織過多結合的染色劑脫去，這個過程稱為分化作用，所用的溶液稱為分化液。在HE染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液，因酸能破壞蘇木素的醌型結構，使組織與色素分離而退色。大多數組織經蘇木素染色后，必須用1%鹽酸乙醇分化，使細胞核過多結合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去，再進行伊紅染色，才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。

4、返藍作用：分化之后，蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態，呈紅色；在堿性條件下處于藍色離子狀態，呈藍色。組織切片經酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色，立即用水除去組織切片上的酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木素染上的細胞核呈現藍色，這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍，但所需時間較長。

自備材料：
1、鹽酸乙醇分化液
2、藍化液，如稀氨水、碳酸鋰溶液等
3、系列乙醇
4、伊紅染色液
5、4%多聚甲醛

操作步驟(僅供參考)：
(一)石蠟切片染色
1、切片脫蠟至水
①二甲苯作用。
②(可選)無水乙醇作用。
③95%的乙醇
④90%的乙醇
⑤80%的乙醇
⑥自來水或蒸餾水沖洗

2、染色
①Delafield蘇木素染色液染色
②自來水或蒸餾水沖洗
③(可選)鹽酸乙醇分化
④自來水沖洗
⑤(可選)藍化液返藍
⑥自來水沖洗
⑦伊紅染色液染色
⑧自來水沖洗

注意事項：
1、切片脫蠟應盡量干凈。系列乙醇應經常更換新液。
2、鹽酸乙醇分化時間應根據切片厚薄、組織類別以及新舊而定，另外分化后自來水沖洗時間應該足夠，以便徹底清洗酸。
3、藍化液常使用0.2～1%氨水或Scott促藍液或0.1～1%碳酸鋰溶液。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。