Fraser增菌液(FB1、FB2)基礎實驗步驟
2021-07-28 13:39 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產品名稱:Fraser增菌液(FB1、FB2)基礎
英文名稱:Fraser Enrichment Base
產品規格:250g
用 途:用于李斯特氏菌的選擇性增菌培養(SN/T 0184-2005),需與Fraser肉湯Ⅰ(FB1)配套試劑和Fraser肉湯Ⅱ(FB2)配套試劑配套使用。
Fraser增菌液(FB1、FB2)基礎樣品處理:
標本可以是液體也可以是固體,液體標本可以直接使用,固體標本需用適量無菌生理鹽水溶解后,取溶液使用。根據濃度需要決定是否采用10倍稀釋法進行稀釋。
實驗材料:天平或臺秤,高壓蒸汽滅菌鍋。玻璃器皿 移液管、試管、燒杯、量筒、錐形瓶、培養皿、玻璃漏斗等。藥匙、稱量紙、pH試紙、記號筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報紙等。
培養基pH的初步調整:
培養基各成分完全溶解后,應進行pH 的初步調正,因培養基在加熱消毒過程中、pH 會有所變化,例如,牛肉浸液約可降低pH0.2.而腸浸液pH 卻會有顯著的升高。因此,對這個步驟,操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的終pH ,保證培養基的質量。pH 調正后,還應將培養基煮沸數分鐘,以利培養基沉淀物的析出。
使用方法
脫水干粉培養基使用:稱取本品干粉 29g,加入 1L 蒸餾水或去離子水。攪拌加熱煮沸至完全溶解121℃15min 高壓蒸汽滅菌,冷至約 50℃,于121℃高壓滅菌 15min,冷卻至 50℃左右時,用 11mol/L 的硫酸調節 pH 至 4.0,混勻,傾注平板。(注:配制不同用量體積,可按比例擴增或縮小。)取 0.1mL樣品液或培養液接種至此平板表面,于 45±2℃培養 3~5d。
【質量控制】
1. 外觀方面
干粉基礎:流動性良好的淡黃色粉末。
平板凝膠:淡黃色凝膠。
2. 生物學方面
下列菌株接種后于于 45±2℃培養 3~5d 生長情況如下表:
菌株 培養時間 生長情況
酸土脂環芽孢桿菌 ATCC49025
45±2℃培養3~5d
生長良好
酸熱脂環芽孢桿菌 ATCC27009 生長良好
大腸埃希氏菌 ATCC25922 不生長
金黃色葡萄球菌 ATCC6538 不生長
【儲存條件及保質期】
脫水干粉培養基:貯存于避光、陰涼干燥處;貯存期三年。用后立即旋緊瓶蓋,防止受潮等。
【注意事項】
1、稱量時注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起不適。
2、干粉培養基使用后立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結塊。貯存于避光、陰涼干燥處。未開封產品保
質期三年。開封后根據存放條件的不同保質時間存在一定的差異。
【廢物處理】
檢測之后帶菌試管及平板置于 121℃下高壓滅菌 30 分鐘處理。
【執行標準】
Q/HKSJ 03 普通微生物培養基