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改良番紅O-固綠軟骨染色液操作步驟

2021-08-03 14:53 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
中文名稱:改良番紅O-固綠軟骨染色液
產(chǎn)品規(guī)格:5×50mL|5×100mL
用途:軟骨染色
注意事項:主要由固綠染色液和番紅O染色液組成。染色時,注意分化時間,否則容易導(dǎo)致過染或脫色
儲存條件:室溫,避光,12個月

產(chǎn)品簡介:軟骨組織由軟骨細胞、軟骨基質(zhì)和纖維組成,軟骨組織及其周圍的軟骨膜構(gòu)成軟骨。軟骨根據(jù)基質(zhì)內(nèi)所含纖維素成分不同分為透明軟骨、彈性軟骨、纖維軟骨。軟骨染色方法有很多種,例如甲苯胺藍法、阿利新藍法、番紅O法等。改良番紅0-固綠軟骨染色法的染色原理在于嗜堿性的軟骨與堿性染料番紅O結(jié)合呈現(xiàn)紅色,嗜酸性的骨和酸性染料固綠結(jié)合而成綠色或藍色,與呈現(xiàn)紅色的軟骨對比鮮明,從而將軟骨組織和骨組織區(qū)分開。番紅O是一種結(jié)合多陰離子的陽離子染料,其顯示軟骨組織是基于陽離子染料與多糖中陰離子基團(硫酸軟骨素或硫酸角質(zhì)素)結(jié)合。番紅O著色與陰離子的濃度近似成正比關(guān)系,間接反映了基質(zhì)中蛋白多糖的含量和分布。當軟骨受到損傷時,軟骨中的糖蛋白會釋放出來,使基質(zhì)成分分布不均勻,從而導(dǎo)致番紅O淡染或不著色。通過圖像分析軟件可對番紅O染色的軟骨基質(zhì)進行定量分析。固綠與膠原纖維結(jié)合,不宜褪色。番紅O-固綠染色的分化很關(guān)鍵,分化過度易導(dǎo)致切片不著色,分化不足易導(dǎo)致切片著色過深。

自備材料:10%福爾馬林固定液,脫鈣液,蒸餾水,系列乙醇。

操作步驟(僅供參考):
1、標本的處理:10%福爾馬林固定、脫鈣、石蠟切片。
2、常規(guī)脫蠟至水。
3、入新鮮配制的Weigert染液染色3-5min,水洗。
4、酸性分化液分化15s。
5、蒸餾水洗10min。
6、在固綠染色液內(nèi)浸染5min。
7、快速用弱酸溶液洗滌切片10-15s,以便去除殘留的固綠。
8、入SafraninOstain內(nèi)浸染5min。
9、按95%乙醇2-3s、無水乙醇2-3s,無水乙醇1min脫水。
10、二甲苯透明,光學(xué)樹脂封固。
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