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Masson三色染色液(固綠法)使用說明書

2021-08-24 13:53 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產(chǎn)品名稱:Masson三色染色液(固綠法)
規(guī)格:7×50ml 7×100ml
用途:經(jīng)典膠原纖維染色,可區(qū)分膠原纖維和肌纖維。
注意事項:染核后能更容易區(qū)分膠原纖維和肌纖維,本試劑盒采用經(jīng)典的Weigert蘇木素。其結果為:膠原纖維呈藍色,胞核呈藍褐色肌纖維、紅細胞等呈紅色。
儲存方式:室溫,避光,12個月

產(chǎn)品說明:
結締組織狹義上是指其含有的三種纖維:膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、彈力纖維,而膠原纖維(collagenfiber)是分布、含量多的一種纖維。Masson 三色染色又稱馬松染色,是結締組織染色中的一種方法,是膠原纖維染色的技術方法。所謂三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關:分子的大小由分子量來體現(xiàn),小分子量易穿透結構致密、滲透性低的組織;而大分子量則只能進入結構疏松的、滲透性高的組織。然而,淡綠或苯胺藍的分子量都很大,因此 Masson 染色后肌纖維呈紅色,膠原纖維呈綠色(淡綠)或藍色(苯胺藍),主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。

三色染色的特點:
①染色穩(wěn)定;
②分化時間短,1~2s;
③色彩清晰鮮艷;
④適用范圍廣,適宜于組織的石蠟切片、冰凍切片等染色;
⑤所染切片保存時間長且不易褪色。
自備材料:
1. 固定液:選用甲醛升gong或甲醛鹽溶液
2. 系列乙醇
3. 蒸餾水

操作步驟:
1. 切片常規(guī)脫蠟水,用配制好的 Weigert 鐵蘇木素染色 5~10min。
2. 用酸性乙醇分化液分化,水洗。
3. 用 Masson 藍化液返藍,水洗。
4. 蒸餾水洗 1min。
5. 麗春紅品紅染色液染色 5~10min。
6. 在上述操作過程中按蒸餾水:弱酸溶液=2:1 比例配制弱酸工作液,用弱酸工作液洗 1min。
7. 磷鉬酸溶液洗 1~2min。
8. 用配制好的弱酸工作液洗 1min。
9. 直接入固綠染色液中染色 1~2min。
10. 用配制好的弱酸工作液洗 1min。
11. 11、95%乙醇快速脫水。無水乙醇脫水 3 次,每次 5~10s。
12. 二甲苯透明 3 次,每次 1~2min。中性樹膠封固。

染色結果:
細胞核,膠原纖維/蛋白 綠色
胞漿、肌肉、紅細胞 紅色

注意事項:
1. 切片脫蠟應盡量干凈。固定起著重要的作用,使用不同的固定液可延或縮短染色時間。
2. 取 A1、A2 等量混合即為 Weigert 鐵蘇木素染液,一般 24h 失去染色力。
3. 酸性乙醇分化時間應根據(jù)切片厚薄、組織的類別和新舊而定。
4. 弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷,如使用量大可自行配制 0.1~0.3%乙酸溶液予以替代。
5. 磷鉬酸分化時要在鏡下控制,分化到膠原纖維呈淡紅色、纖維呈紅色即可。分化時間根據(jù)染色深淺而定,一般 1~2min。
6. Masson 藍化液亦可自行配制 Scott 促藍液或 0.1~1%碳酸鋰水溶液予以替代
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