鈣鹽染色液(改良茜素紅S法)染色步驟
2021-11-08 14:56 作者:洛辰 來源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
中文名稱:鈣鹽染色液(改良茜素紅S法)
分類:金屬及鹽染色
產(chǎn)品規(guī)格:3×50mL|3×50mL
用途:組織學(xué)鈣鹽染色
注意事項(xiàng):鈣沉積物成橙紅色,染色時(shí)間取決于鈣的含量,檢測少量鈣時(shí)更有效。復(fù)染液為mayer蘇木素。
儲(chǔ)存條件:4℃,避光,12個(gè)月
簡介:鈣在人體內(nèi)大量存在,構(gòu)成骨骼作為支持人體的支架,在分泌、運(yùn)送、肌肉收縮、神經(jīng)傳導(dǎo)等也起重要作用。鈣在機(jī)體內(nèi)以兩種形式存在,一種是離子鈣,存在血液循環(huán)內(nèi),即所謂血鈣;另一種是結(jié)合鈣,和蛋白、碳酸或磷酸結(jié)合而沉著在組織內(nèi)。除骨骼和牙齒外,正常時(shí)鈣滲透在所有組織和細(xì)胞中,一般不以固體狀態(tài)出現(xiàn)在組織內(nèi)。但在某些情況下,鈣析出成固體并沉著于組織內(nèi),則為病理性鈣鹽沉著。沉著的鈣鹽主要是磷酸鈣,其次為碳酸鈣。鈣鹽通常是單折射的,但草酸鈣是雙折射的。當(dāng)使用HE染色時(shí),鈣一般呈紫藍(lán)色。許多染料可以于鈣形成螯合物,包括茜素紅S、紅紫素、核固紅等。茜素紅S屬一種蒽醌類衍生物,是茜素磺酸鈉鹽,它能與碳酸鈣或磷酸鈣中的鈣鹽螯合形成橙紅色復(fù)合物。一般來說這些染料在識(shí)別中至大量的鈣時(shí),效果優(yōu)于輕微染色的微量鈣沉積。但茜素紅S往往對(duì)少量的沉積物可得到更可靠的結(jié)果。鈣鹽染色常用方法有硝酸銀法和茜素紅S法,本染色液采用改良McGee-Russell法,用茜素紅S和Mayer蘇木素,鈣鹽和蘇木素結(jié)合形成藍(lán)紫色沉淀,尤其適用于少量鈣鹽組織的染色。
自備材料:
1.10%中性福爾馬林固定液
2.自來水
3.顯微鏡
操作步驟(僅供參考):
1、組織固定于10%中性福爾馬林,常規(guī)脫水包埋。
2、切片厚5μm,常規(guī)脫蠟至水。
3、切片用茜素紅S染色液滴染1-5min(見注意事項(xiàng)1)。
4、稍水洗。
5、McGee-Russell分化液迅速分化數(shù)秒。
6、Mayer蘇木素染色液淺染胞核1-2min。
7、流水沖洗10min。
8、常規(guī)脫水透明,中性樹膠封固。
染色結(jié)果:
鈣沉積物 橙紅色
細(xì)胞核 藍(lán)色
注意事項(xiàng):
1、 茜素紅S染色時(shí)間要根據(jù)鈣鹽的含量來確定。可在顯微鏡下觀察,見鈣鹽呈較深的橙紅色即取出水洗,如染色時(shí)間過長,就出現(xiàn)彌散現(xiàn)象,一般1~2min即可。
2、 經(jīng)過茜素紅S染色液染色后,鈣沉積物是雙折射的。
3、 茜素紅S法在辨別和檢測少量鈣時(shí)特別有用。
4、本試劑僅限于實(shí)驗(yàn)室科研使用。