冰凍切片快速抗原修復(fù)液使用說明書
2021-11-23 14:20 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產(chǎn)品名稱:冰凍切片快速抗原修復(fù)液
規(guī) 格:100ml
用 途:適合用于冰凍切片的快速抗原修復(fù)液,只需室溫孵育5分鐘即可完成對冰凍切片樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)。
注意事項:本抗原修復(fù)液含有了廣泛使用的SDS等抗原修復(fù)試劑等,pH值約為7.4,可以快速有效地去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián)。
儲存條件:4℃,12個月
簡介:
冰凍切片快速抗原修復(fù)液是一種特別適合用于冰凍切片的快速抗原修復(fù)液,只需室溫孵育5分鐘即可完成對冰凍切片樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)。本產(chǎn)品特別適合用于冰凍切片的抗原修復(fù)并用于后續(xù)的免疫染色。
通常石蠟切片都需進行抗原修復(fù)處理,而冰凍切片可以不進行抗原修復(fù)處理??乖迯?fù)會大大改善石蠟切片的免疫染色效果,但對于冰凍切片的染色效果很多文獻資料表明也有顯著改善。特別是當冰凍切片免疫染色效果欠佳時,可以考慮嘗試進行抗原修復(fù)。從原理上來看,無論冰凍切片還是細胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定的樣品,進行抗原修復(fù)都會有效去除蛋白之間的交聯(lián),充分暴露抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。
規(guī)格說明:
一個包裝的本產(chǎn)品可以配制成500毫升抗原修復(fù)液(1X)。按照每個片子需要10毫升抗原修復(fù)液(1X)計算,一個包裝的本產(chǎn)品可以用于50個樣品。按照每個片子需要5毫升抗原修復(fù)液(1X)計算,則一個包裝的本產(chǎn)品可以用于100個樣品。
操作方法:
對于石蠟切片:
脫蠟:切片在二甲苯中脫蠟5分鐘,再換用新鮮的二甲苯脫蠟,共用二甲苯脫蠟3次。無水乙醇5分鐘,兩次。90%乙醇5分鐘,兩次,70%乙醇5分鐘,一次。蒸餾水5分鐘,兩次。
抗原修復(fù):將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1X)中,室溫孵育5分鐘。用免疫染色洗滌液洗滌3~5次,每次3~5分鐘,以充分去除殘留的SDS等試劑。隨后即可進行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
對于冰凍切片:
用免疫染色洗滌液洗滌切片5分鐘。將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中,室溫孵育約5分鐘。用免疫染色洗滌液洗滌3~5次,每次3~5分鐘,以充分去除殘留的SDS等試劑。隨后即可進行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
對于其它樣品的抗原修復(fù),可以參考石蠟切片或冰凍切片的步驟進行。
注意事項:
抗原修復(fù)過程可以使用染色缸和染色架或郵寄夾進行操作。塑料染色缸、染色架和郵寄夾可以很好地耐受沸水浴,而玻璃染色缸需避免驟冷驟熱導(dǎo)致的玻璃破碎。
本抗原修復(fù)液使用前必須先充分溶解并混勻,然后用重蒸水或MilliQ水稀釋5倍,配制成抗原修復(fù)液(1X)。