苯基-瓊脂糖凝膠6FF說明書
2022-01-20 14:22 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
中文名稱:苯基-瓊脂糖凝膠6FF
英文名稱:Phenyl-Sepharose 6 Fast Flow
產品規格:25ml
苯基-瓊脂糖凝膠6FF適合純化含芳香族(aromatic)配體的蛋白,特別是單抗。
性狀:白色微球,凝膠狀,保存在20%酒精溶液中
凝膠類型:疏水層析介質
結構成分:6%交聯瓊脂糖
粒徑:45-165um
工作PH值:2-14(短時間);3-13(長時間)
操作溫度:4-40℃
配基密度:20μmol/mL
保存條件:4~25℃密閉保存
應用:疏水層析介質,快流速,適合生物大分子和疫苗的分離純化等。
苯基-瓊脂糖凝膠6FF分離技巧:
(1) 分離時流速不可太快,切切不可心急,所謂欲速則不達;接餾分時可開全速,節省時間。
(2)柱子盡可能長,葡聚糖凝膠柱長的增加將極大地改善分離,所不要吝惜填料,寧可將填料全裝在一根大柱子中,不要將填料裝成幾根小柱。所謂集中優勢兵力,打擊敵人。
(3) 餾分一定要接的細,可1/10,或1/20 個保留體積接成一餾分。
(4) 洗脫體積一般為2-3個保留體積,對特殊保留強的化合物,可洗脫5個保留體積。
(5)鞣質成分死吸附嚴重,如不在乎填料者,可用Sephadex LH20 分鞣質
(6)葡聚糖凝膠對黃酮類成分的分離效果極佳,方法很成型,有大量文獻參考。
(7)填料反復使用,每次用完,一般可用甲醇將柱子洗干凈,然后用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來,待用。暫時不用試可以水洗→含水醇洗(醇的濃度逐步遞增)→醇洗,最后泡在醇中貯于磨口瓶中備用。如長期不用時,可在以上處理基礎上,減壓抽干,再用少量乙迷洗凈抽干,室溫充分揮散至無醚味后,60~80°C干燥后保存。