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大腸桿菌/大腸菌群液體顯色培養基說明書

2022-06-17 16:30 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產品名稱:大腸桿菌/大腸菌群液體顯色培養基
英文名稱:E.Coli/Coliform Broth Chromogenic Medium
供應商:遠慕生物
產品規格:100g
分類:顯色培養基
產品用途:用于快速、準確同時檢測大腸桿菌和大腸菌群,培養24小時,大腸桿菌顯藍色熒光,大腸菌群顯藍色。

成份(g/L)
特殊營養物質 33.0
顯色劑 0.3
瓊脂 13.0
pH 7.0±0.2  25℃
此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得最/佳的結果。

用法:
稱取本品 46.3g 加入 1000ml 蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過 1 分鐘。取1ml制備好的樣品液加入直徑為 9cm 無菌平皿中心,傾入冷卻至 45-50℃ 培養基約 15ml,混勻,凝固后,再加入一層培養基進行履蓋。或冷卻至 45-50℃ 時,傾入無菌平皿,瓊脂完全凝固后,在 37℃ 的培養箱中倒置放置 1-2 小時,加入適當稀釋度的樣品液 1ml,涂布于培養基上,36℃ 培養 18~24h。

操作步驟
1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液;
2、取樣品液 1ml 加入冷卻至 45-50℃ 顯色培養基中混勻或涂布于平板上;
3、36℃培養 18~24h,選用有 30~200 個菌落的平板,計數平板上出現的典型大腸菌群和大腸桿菌菌落。大腸桿菌典型菌落為藍色至紫色,大腸菌群為粉紅色菌落,其它細菌為無色或黃色菌落 ;總大腸菌群=藍色菌落+紫色菌落+粉紅色菌落   大腸桿菌=藍色菌落+紫色菌落;
4、對可疑大腸桿菌菌落可劃線接種到營養瓊脂平板上,36℃ 培養 12-16 小時,挑取單菌落做大腸桿菌全套生化試驗(遠慕生物有生化鑒定管套裝 4種x4套)。

質量控制
1、外觀
此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈乳白色至淡粉紅色。制備好的平板呈無色半透明固體培養基,稍有些沉淀物。
2、微生物試驗
在 36℃ 培養 18~24h 小時:

 質控菌株

 ATCC

 生長情況

 菌落顏色

金黃色/葡萄球菌

25923

-/+

無色

 大腸桿菌

 25922

+++

 藍色

 沙門氏菌

14028

+++

 無色

 陰溝腸桿菌

 23355

+++

 粉紅色

產氣腸桿菌

 35029

 +++

 粉紅色

弗氏檸檬酸鹽桿菌

 43864

 +++

 粉紅色

肺炎克雷伯氏菌

10031

+++

粉紅色

方法的局限性
本培養基鑒定大腸菌群/大腸桿菌,少數情況下可能會出現假陽性,但不會出現假陰性,有時可能需做其它補充試驗。

典型特征
大腸桿菌典型菌落為藍色至紫色,大腸菌群為粉紅色菌落,其它細菌為無色菌落。

貯存
制備好的平板應立即使用,應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。

失效
干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。

注意
此培養基僅供實驗室使用。

大腸桿菌/大腸菌群顯色培養基(第二代)的微生物靈敏度試驗:
按標簽用法制備培養基,接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養18-24小時。
注:回收率計算時,用TSA瓊脂做對照培養基。
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