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O157顯色培養(yǎng)基檢驗原理

2022-06-23 15:14 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產(chǎn)品名稱:O157顯色培養(yǎng)基
英文名稱:O157 chromogenic medium
供應(yīng)商:遠慕生物
規(guī)格: 100g
保質(zhì)期:三年
用途:用于O157菌的顯色培養(yǎng),O157菌顯亮紅色、淡紅色或紅色
備注:需添加CT添加劑

簡介:大腸桿菌O157:H7顯色培養(yǎng)基用于食品、病人糞便樣品中O157:H7菌的快速檢測。O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周圍沒有藍色暈圈,大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍色、藍色或紫色,菌落周圍有藍色暈圈;其它細菌顯藍色、黃色或無色。本培養(yǎng)基的特異性高,可以克服SMAC培養(yǎng)基引起的假陽性和假陰性結(jié)果,是一種很理想的快速檢測培養(yǎng)基。

成份(g/L)
特殊營養(yǎng)物質(zhì) 68.4
混合顯色劑  2.6
瓊脂 15.0
pH7.0±0.1  25℃ 
CT添加劑  1ml/支*5(已配套,無需另購)
此配方可以進行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得最/佳的結(jié)果。

用法
稱取本品 17.2g 加入 200ml 蒸餾水,加熱煮沸溶解并不停攪拌,加熱 2 分鐘左右。冷卻至 45-50℃ 時,加入一支CT添加劑混勻,傾入無菌平皿。
注意:制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥,可在 36℃ 的培養(yǎng)箱中倒置放置 1-2 小時。

原理
利用大腸桿菌O157 自身代謝產(chǎn)生的酶與相應(yīng)顯色底物反應(yīng)使菌落顯色,以區(qū)分目標菌與非目標菌。顯色底物是由產(chǎn)色因子和微生物部分可代謝物質(zhì)組成,在特異性酶作用下,游離出產(chǎn)色因子使菌落顯示一定顏色。

操作步驟
1、按國家標準、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液;
2、取 25 克樣品液加入 225ml  mEC肉湯或mTSB肉湯中,36℃ 增菌培養(yǎng) 18-24 小時;
3、用 3mm 接種環(huán)取 1 環(huán)增菌液,劃線接種到O157菌顯色培養(yǎng)基上,做 2 個平板;
4、36℃ 培養(yǎng) 18-24h,O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周圍沒有藍色暈圈;大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍色、藍色或紫色,菌落周圍有藍色暈圈;其它細菌顯藍色、黃色或無色;
5、對典型菌落可做O157:H7菌血清學(xué)試驗和全套生化試驗。
注:必須在 36℃ 培養(yǎng) 24 小時內(nèi)判讀結(jié)果,以免菌落顏色發(fā)生變化。

質(zhì)量控制
1、外觀
此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈灰白色。制備好的平板呈藍色固體培養(yǎng)基。
2、微生物試驗
在 36℃ 培養(yǎng) 18-24h 小時:

 質(zhì)控菌株

 ATCC 

 生長情況

 菌落顏色

 大腸桿菌O157

 35150

 +++

 亮紅色

 金黃色葡萄球菌

 25923

 -/+

 黃色或無色

 大腸桿菌

 25922

 +/-

 暗藍色,菌落周圍有藍色暈圈

 沙門氏菌

 14028

 +++

 藍色

 奇異變形桿菌

 12453

 +/-

 無色

 肺炎克雷伯氏菌

 10031

 +/-

 藍色,菌落周圍有藍色暈圈

 弗氏檸檬酸鹽桿菌

 43864

 +/-

 藍色菌落有紫色中心,菌落周圍有藍色暈圈

 坂崎桿菌

 29004

 ++

 紫色至藍色

方法的局限性
本培養(yǎng)基上的典型大腸桿菌O157:H7必須做血清學(xué)試驗或生化試驗。

典型特征
典型大腸桿菌O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,菌落周圍沒有藍色暈圈;大腸桿菌和大腸菌群顯藍色或紫色,菌落周圍有藍色暈圈;其它細菌顯藍色、黃色或無色;

貯存
制備好的平板可保存 2-5 天,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。

失效
干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。

注意
此培養(yǎng)基僅供實驗室使用。
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