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水平板計數瓊脂培養基使用說明書

2022-09-13 15:28 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產品名稱:水平板計數瓊脂培養基
英文名稱: Water Plate Count Agar
供應商:遠慕生物
產品規格: 250g
用途:用于水中微生物細菌總數計數

原理:蛋白胨提供碳源和氮源;葡萄糖提供能源;瓊脂是培養基的凝固劑。
用法:稱取本品65.0g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻至50℃左右時,加入過濾除菌的氯霉素50mg,混勻,傾入無菌平皿。
【注意事項】:由于液體培養基不易長期保管,現在均改制成粉末。

培養基有天然、人工兩種水平板計數瓊脂培養基一般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調pH至7.2~7.4,若pH值超過7.6或遠低于6.8,則大多數細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。

水平板計數瓊脂培養基的保存
1)干粉,買了后一定要保存在4度。有人保存在-20度我認為沒有必要。但4度是非常必要的。保證期是有提示的。
2)配好的無血清培養基一定保存在4度,保存不要超過3個月。用時根據提示要加入谷胺酰胺。
3)加入血清的培養基,最好保存在4度不要超過1個月,從時間太長,活性下降。當然稍微長點也不一定出問題。但是根據細胞而定;如果原代培養,最好新鮮,如果是腫瘤細胞,或僅維持傳代就不太要緊。但是原則是越新越好。

水平板計數瓊脂培養基微生物靈敏度試驗:
按標簽用法制備培養基,接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養48±2小時。
注:回收率計算時,用TSA瓊脂做對照培養基。
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