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產(chǎn)品分類

【核酸染料選擇】遠(yuǎn)慕教您選擇符合實(shí)驗(yàn)要求的核酸染料

2023-03-29 9:48 作者:洛辰 來源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
核酸染料是一種靈敏、穩(wěn)定和相對(duì)安全的熒光核酸染色試劑,是生物實(shí)驗(yàn)中不可或缺的一分子,尤其是在核酸檢測相關(guān)試驗(yàn)中,所以核酸染料對(duì)于分子生物學(xué)相關(guān)專業(yè)的學(xué)生來說并不陌生,該如何選擇適合自己使用的核酸染料呢?以下從幾個(gè)方面來說明:
1、安全性:如果選擇EB替代染料,那么染料的安全性就是一個(gè)非常重要的指標(biāo)。安全性評(píng)估主要的檢測有Ames測試、細(xì)胞滲透性實(shí)驗(yàn)、染色體畸變和正向突變分析、口服毒性分析等。在安全性方面,具有較多檢測項(xiàng)目和機(jī)構(gòu)出具檢測報(bào)告的核酸染料,安全性可能會(huì)更高;另外在一些報(bào)道或?qū)Ρ葦?shù)據(jù)中,我們也可根據(jù)它們可能的原料來判斷它們的安全性。

2、 穩(wěn)定性:核酸染料的穩(wěn)定性和在各種條件下的染色效果,會(huì)直接影響觀察到的染色結(jié)果。

3、靈敏度:幾乎所有的EB替代染料都其染料的靈敏度至少不低于EB,甚至高于EB,具體到試驗(yàn)內(nèi)容上,只要不是有特殊的需求,一般都能滿足。

4、遷移率:由于核酸染料最終都會(huì)結(jié)合到DNA上,才能通過染料從而對(duì)DNA進(jìn)行分析,這也就意味著如果采用點(diǎn)染法或膠染法進(jìn)行核酸檢測時(shí),根據(jù)使用的染料不同,核酸染料或多或少會(huì)對(duì)核酸的遷移率甚至帶型產(chǎn)生影響。

核酸染料說明書

產(chǎn)品介紹:

GoldView 是一種可代替溴化乙錠(EB)的新型DNA染料,其靈敏度與EB相當(dāng),使用方法與之完全相同。在紫外燈下雙鏈DNA呈現(xiàn)綠色熒光。通過小鼠皮下注射實(shí)驗(yàn),尚未發(fā)現(xiàn)GoldView有致癌作用;而溴化乙錠(EB)是一種強(qiáng)致癌劑,因此用GoldView代替EB不失為一種明智的選擇。

● 儲(chǔ)存條件:

室溫貯存一年。

● 實(shí)驗(yàn)操作步驟:

100ml溶膠液在微波爐中融化,冷卻至60℃左右(不燙手)后加入10μl GoldView,輕輕搖勻后到膠,待膠完全凝固后上樣電泳,電泳完畢在紫光燈下觀察。

● 注意事項(xiàng):

1. 膠厚度不要超過0.5cm,膠太厚會(huì)影響檢測的靈敏度。

2. GoldView在pH 3.6-7.0之間能更好地與核酸結(jié)合,因此電泳時(shí)最好使用新鮮的電泳緩沖液。

3. 由于GoldView染色后DNA產(chǎn)生綠色熒光,因此不適于用一般單色膠卷拍照,可以使用凝膠成像系統(tǒng)保存圖象。

4. GoldView特別適合于大片段DNA的檢測(大于1kb的片段,檢測靈敏度與EB相當(dāng));當(dāng)DNA片段小于1kb時(shí),檢測靈敏度低于EB,特別是低于500bp的片段,GoldView可能亮度很弱或檢測不到。

5. 雖然尚未發(fā)現(xiàn)GoldView有致癌作用,但由于GoldView溶液酸性較強(qiáng),因此對(duì)皮膚、眼睛會(huì)有一定的刺激,操作時(shí)應(yīng)戴手套。
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