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產品名稱:

改良Lowry法蛋白定量試劑盒

 
產品編號: R18295 
改良Lowry法蛋白定量試劑盒
改良Lowry法蛋白定量試劑盒由上海遠慕生物提供介紹,本司所供應的試劑品種齊全,滿足于客戶的需求,包含有:動物血清,標準品對照品,化學試劑,生化試劑,染色液,實驗耗材,溶液,緩沖液,培養基,抗體,抗原,蛋白質,其他生物試劑等,我們所銷售的試劑有進口試劑及國產試劑供您選擇,價格實驗,如有需要,歡迎訂購!

中文名稱:改良Lowry法蛋白定量試劑盒
英文名稱:Leagene
規格:100T/500T
供應商:上海遠慕
類別:蛋白檢測
儲存方式:室溫,避光,12個月
主要用途:微板法,又稱Folin-酚法,定量測定測蛋白濃度。
注意事項:利用蛋白中肽鍵與銅離子結合成四配位基銅離子復合物,后者與Folin試劑(福林酚)反應,產生藍色比色物,用分光光度法(酶標儀或分光光度計)檢測750nm處吸光度。
適用范圍:限于科研實驗,不作臨床。

簡介:
目前世界上最常用的蛋白濃度檢測方法是:BCA蛋白定量試劑盒(BCA?Protein?AssayKit)和Bradford蛋白定量試劑盒(Bradford?Protein?Assay?Kit)。Leagene?改良Lowry法蛋白定量試劑盒是利用蛋白中肽鍵與銅離子結合成四配位基銅離子復合物,后者與Folin試劑(福林酚)反應,產生藍色比色物,用分光光度法(酶標儀或分光光度計)檢測750nm處吸光度,并與標準曲線比較,求得待測蛋白樣品的濃度,在1~1500μg/ml濃度范圍內有較好的線性關系

操作步驟:
1、?取1ml蛋白標準配制液加入到蛋白標準(BSA)(20mg)中,充分溶解后配制成20mg/ml的蛋白標準溶液,配制后可立即使用,溶解后的蛋白標準溶液應-20℃保存。
2、?取適量20mg/ml蛋白標準,稀釋至終濃度為1500μg/ml或所需濃度。如取75μl?20mg/ml蛋白標準,加入925μl稀釋液,充分混勻,即配制1500μg/ml蛋白標準。特別提示:待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中。例如待測蛋白溶解于蔗糖中,亦取蛋白標準溶解于蔗糖中。一般也可以用NaCl或PBS作為溶解BSA稀釋液。稀釋后的蛋白標準也應-20℃長期保存.
3. 根據樣品數量,按Folin-Ciocalteu?Reagent:ddH2O?=1:1的比例配制Folin-Ciocalteu工作液,充分混勻.
4. 根據樣品數量,按試劑(B1):試劑(B2):試劑(B3)比例配制改良Lowry?Reagent工作液,充分混勻。例如取Lowry?A、Lowry?B、Lowry?C,配制成改良Lowry?Reagent工作液。
5. 將蛋白標準用稀釋待測樣品的溶液梯度稀釋,濃度分別為300μg/ml、60μg/ml、12μg/ml、2.4μg/ml、0μg/ml,加到96孔板的標準品孔。
6. ?加40μl待測蛋白樣品或稀釋液(空白對照)到96孔板的樣品孔中,如果標準品稀釋液與溶解待測蛋白樣本的溶液不同,應在待測蛋白樣本孔中加入稀釋液;如果標準品稀釋液與溶解待測蛋白樣本的溶液相同,無需在待測蛋白樣本孔中加入稀釋液.
7. ?用多通道微量移液器快速將200μl?配置好的改良Lowry?Reagent工作液加入至各孔,立即在96孔板混勻器上混勻或手動輕輕混勻。室溫準確孵育.
8. 用多通道微量移液器快速將20μl新鮮配置的Folin-Ciocalteu工作液加至上述各孔中,立即在96孔板混勻器上混勻或手動輕輕混勻。加蓋以防止液體揮發,室溫準確孵育
9. 輕輕混勻96孔板,酶標儀或微量滴定板讀數儀測定750nm處吸光度,也可用分光光度計測定,但應考慮根據比色皿的最小檢測體積,檢測樣品數量亦相應減少。

生物試劑的使用常識:
(1)試劑切忌與手接觸(有些試劑有強腐蝕性、等特)。
(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,絕對不允許用同一種工具同時連續取用多種試劑。取完一種試劑后,應將工具洗凈(藥勺要擦干)后,才可取用另一種試劑。
(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后請及時將瓶放回原處,以免遺忘,帶來不便。
(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(怕產生原試劑的再次污染)。

購買后注意事項:
1、購買后,請務必確認標簽上的注意事項.
2、請嚴格按照產品說明書上的要求進行歸范化操作。
3、在實驗過程中,盡可能避免披頭散發及用嘴巴去直接觸碰產品。
4、在實驗中遇到不懂之處,不可擅自進行違規操作,應該請教專業人員。
5、必須戴好防護用具,小心翼翼進行操作。

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