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人可溶性白細胞分化抗原28(sCD28)ELISA試劑盒使用說明書

2023-12-28 11:21 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產品名稱:人可溶性白細胞分化抗原28(sCD28)ELISA試劑盒
英文名稱:Human soluble cluster of differentiation 28 (sCD28) ELISA Kit
試劑盒保存:保質期六個月,保存環境2-8℃(頻繁使用時);-20℃(較長時間不用時)。
性狀:試劑盒(含試劑+酶聯板+覆膜等)
規格:48T/96T,可以提供定量和定性
使用范圍:僅供科研檢測,不得用于臨床.

實驗原理:
本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本加入到預先包被人可溶性白細胞分化抗原28多克隆抗體透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分,再加入酶標工作液,溫育足夠時間后,洗滌除去未結合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉化為藍色產物,在酸的作用下變成黃色,顏色的深淺與樣品中人可溶性白細胞分化抗原28濃度呈正相關,450nm波長下測定OD值,根據標準品和樣品的OD值,計算樣本中人可溶性白細胞分化抗原28含量。

操作注意事項:
(1)試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
(2)實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
(3)不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
(4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
(5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
(6)洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

名稱    96孔配置    48孔配置    備注
微孔酶標板    8孔×12條    8孔×6條    無
標準品    0.3mL*6管    0.3mL*6管    無
樣本稀釋液    6mL    3mL    無
檢測抗體-HRP    10mL    5mL    無
20×洗滌緩沖液    25mL    15mL    按說明書進行稀釋
底物A    6mL    3mL    無
底物B    6mL    3mL    無
終止液    6mL    3mL    無
封板膜    2張    2張    無
說明書    1份    1份    無
自封袋    1個    1個    無

人可溶性白細胞分化抗原28(sCD28)ELISA試劑盒質量保證樣本處理及要求:
1.  血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過一夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.  血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.  組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4.  細胞培養物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

人可溶性白細胞分化抗原28(sCD28)ELISA試劑盒質量保證標本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

 
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