人轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒說明書
2024-01-03 11:49 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
中文別名:人轉(zhuǎn)化生長因子Β2(TGFΒ2)ELISA試劑盒
英文名稱:Human transforming growth factors β2, TGFβ2 Elisa Kit
特異性:可檢測樣本中的人轉(zhuǎn)化生長因子β2,且與其類似物無明顯交叉反應。
種屬: 人
保存溫度: 2-8℃
樣本類型: 血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清 和 其他生物液體
背景:
轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)前體蛋白由19個氨基酸的信號肽、283個氨基酸的前區(qū)和112個氨基酸的成熟區(qū)組成。人TGF-β2成熟區(qū)與人TGF-β1和TGF-β3的同源性分別為71%和80%,與小鼠TGF-β2的同源性為97%。它可由各類細胞表達,包括破骨細胞、胸腺上皮細胞、角蛋白細胞、肝細胞、胃的主細胞和衛(wèi)星細胞等。TGF-β2具有顯著的種屬交叉生物活性,如人TGF-β2對小鼠細胞具有活性,而豬TGF-β2對兔細胞具有活性等。TGF-β2具有4種基本活性:是大部分類型細胞的生長抑制因子;可增強細胞外基質(zhì)的沉積;具有免疫抑制作用,抑制抗原遞呈細胞表達IL-12和CD40L,上調(diào)IL-10分泌;在胚胎發(fā)育期表達于離散區(qū)域,如上皮、心肌、手足的軟骨和骨骼、以及神經(jīng)系統(tǒng),提示其具有特異性的功能。
工作原理:本試劑盒采用的是雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)(ELISA)。測定樣品中人轉(zhuǎn)化生長因子β2水平。向預先包被了抗人轉(zhuǎn)化生長因子β2抗體的酶標孔中,加入標準品和樣本,溫育后,加入生物素標記的抗轉(zhuǎn)化生長因子β2抗體。再與HRP標記的鏈霉親和素結(jié)合,形成免疫復合物,再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶,然后加入顯色底物TMB,產(chǎn)生藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。最后,在450 nm處測定反應孔樣品吸光度(OD)值,樣本中的人轉(zhuǎn)化生長因子β2濃度與OD值成正比,通過繪制標準曲線計算出樣本中人轉(zhuǎn)化生長因子β2的濃度。
產(chǎn)品描述
試劑名稱 數(shù)量 試劑名稱 數(shù)量
96孔板(預包被) 1 96孔板覆膜 2
標準品 2 稀釋液 1×45mL
檢測溶液A 1×120μL 檢測溶液B 1×120μL
TMB底物 1×9mL 終止液 1×6mL
濃洗滌液(30×) 1×20mL 使用說明書 1
需自備的設備及試劑
450±10nm濾光片的酶標儀(建議儀器使用前提前預熱)
單道或多道微量加液器及吸頭
稀釋樣品的EP管
蒸餾水或去離子水
吸水紙
盛放洗液的容器
試劑盒的儲存及有效期
未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃。
使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
穩(wěn)定性
經(jīng)測定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
注意:
試劑盒內(nèi)酶標條可拆卸,按實驗需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在首次實驗后 1個月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時間以盒子上的標簽為準,保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。