電泳緩沖液是核酸、蛋白質(zhì)凝膠電泳系統(tǒng)的一個(gè)重要組成，是電泳場中的導(dǎo)體，也是維持電泳系統(tǒng)恒定 pH值的必要條件。它是指在進(jìn)行分子電泳時(shí)所使用的緩沖溶液，用以穩(wěn)定體系酸堿度。常見的核酸電泳緩沖液有：TAE、TBE、TPE和MOPS等。
電泳緩沖液的作用
緩沖液在電泳過程中的一個(gè)作用是維持合適的pH。電泳時(shí)陽極與陰極都會(huì)發(fā)生電解反應(yīng)，陽極發(fā)生的是氧化反應(yīng)（4OH--4e->2H2O+O2)，陰極發(fā)生的是還原反應(yīng)（4H++4e->2H2)，長時(shí)間的電泳將使陽極變酸，陰極變堿。一個(gè)好的緩沖系統(tǒng)應(yīng)有較強(qiáng)的緩沖能力，使溶液兩極的pH保持基本不變。
電泳緩沖液的另一個(gè)作用是使溶液具有一定的導(dǎo)電性，以利于DNA分子的遷移，例如，一般電泳緩沖液中應(yīng)含有0.01-0.04mol/L的Na+離子，Na+離子的濃度太低時(shí)電泳速度變慢；太高時(shí)就會(huì)造成過大的電流使膠發(fā)熱甚至熔化。
電泳緩沖液還有一個(gè)組分是EDTA，加入濃度為1-2mmol/L，目的是螯合Mg2+等離子，防止電泳時(shí)激活DNA酶，此外還可防止Mg2+離子與核酸生成沉淀。
電泳緩沖液的配制方法
1、MOPS
MOPS Buffer，即3-嗎啉丙磺酸緩沖液，屬于生物緩沖劑，可作為二維凝膠電泳中等電聚焦電泳（IEF）的電解質(zhì)系統(tǒng)成分；還可應(yīng)用于Northern雜交，作為RNA的分離和轉(zhuǎn)膜時(shí)的緩沖液。
常用的10×MOPS Buffer配制方法如下：
（1）稱量41.8 g MOPS，溶解于約700mL DEPC處理水中；
（2）使用2 N NaOH 調(diào)節(jié)pH值至7.0；
（3）向溶液中加入DEPC處理的1M NaOAC 20mL、0.5M EDTA(pH8.0) 20mL；
（4）定容至1 L，用0.45 μm 濾膜過濾除去雜質(zhì)，室溫避光保存。
2、TAE
TAE是使用最廣泛的緩沖系統(tǒng)。其特點(diǎn)是超螺旋在其中電泳時(shí)更符合實(shí)際相對(duì)分子質(zhì)量（TBE中電泳時(shí)測出的相對(duì)分子質(zhì)量會(huì)大于實(shí)際分子質(zhì)量），且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率較其他兩種（TAE和TBE）緩沖液快約10%，電泳大于13kb的片段時(shí)用TAE緩沖液將取得更好的分離效果，此外，回收DNA片段時(shí)也易用TAE緩沖系統(tǒng)進(jìn)行電泳。
50×TAE Buffer 配制方法：
1。稱量Tris 242g，EDTA 18.612g于1L燒杯中；
2。向燒杯中加入約800ml去離子水，充分?jǐn)嚢杈鶆颍?/span>
3。加入57.1ml的冰乙酸，充分溶解；
4。用NaOH調(diào)pH至8.3，加去離子水定容至1L后，室溫保存。
使用時(shí)稀釋50倍或100倍 即1×TAE Buffer 或 0.5×TAE。
3、TBE
TBE（Tris硼酸），是一種PCR技術(shù)中用到的緩沖液。
TBE配方：
1、使用液（0.5×）
0.045mol/L Tris-硼酸 0.001mol/L EDTA 采用無菌水溶解混勻，溶液體積為1L。
2、濃貯存液（5×）
54gTris堿 27.5g硼酸 20ml 0.5mol/L EDTA 采用無菌水溶解混勻，NaOH調(diào)pH至8.0，溶液體積1L。
![雙[三(羥甲基)氨基甲烷],CAS:6976-37-0](http://struc.chem960.com/strucimg/7000/ctzw0nzi34oyob9fnlmhiwee.png)
