細胞實驗室建設，你必須知道的5件事!
2020-06-04 11:48 作者：洛辰 來源：上海遠慕生物試劑
組織細胞培養技術研究的對象不一般，它是具有完整生命力的生物單位，因此與其他一般實驗工作不同，要求保持無菌操作，避免微生物及其他有害因素的影響。本文將主要針對細胞培養實驗室，講解建設使用注意事項。
一、基礎建設方案之墻頂地
（1）墻體
廢物暫存間、強電間、水處理間可采用乳膠漆墻面，其他實驗室區域采用玻鎂板墻體。玻鎂板是氧化鎂、氯化鎂、和水三元體系，具有防火防水、無味無毒、高強質輕、施工方便、使用壽命長等特點。
（2）天花
防火等級達到A級：天花選用彩鋼板。實用美觀，且易清潔消毒、光滑防水。
防火等級達到B1級：天花選用鋁扣板。可大幅度降低通風和機電施工及維修的難度和強度，也利于日后的正常維護和檢修。
（3）地面
地面材料的選擇通常要求抗靜電、抗菌耐磨、耐腐蝕、防火、防塵、降噪音等，色澤選擇和墻體統一或相似的2.2mm厚進口品牌PVC卷材，防火等級為B級以上。
二、細胞實驗室的設計分區
細胞培養實驗室應能進行六方面的工作：
無菌操作、孵育、制備、清洗、消毒滅菌處理、儲藏。
無菌操作區——
理想的無菌操作室應劃為三部分：
●更衣室：供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
●緩沖間：位于更衣間與操作間之間。
目的是為了保證操作間的無菌環境，同時可放置恒溫培養箱及某些必需的小型儀器。
（37℃恒溫細胞培養箱）
●無菌操作間：專用于無菌操作、細胞培養。
大小要適當，且其頂部不宜過高（不超過2.5m），以保證紫外線的有效滅菌效果；
墻壁光滑無死角以便清潔和消毒；
工作臺安置不應靠墻壁，臺面要光滑壓塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖組織及酚紅顯示pH的觀察。
孵育區——本區對無菌的要求雖不比無菌區嚴格，但仍需清潔無塵，因此也應設置在干擾少而非來往穿行的區域。孵育可在孵箱或可控制溫度的溫室中進行，后者費用高，一般實驗室多采用孵箱進行工作。
儲藏區——主要存放各類冰箱、干燥箱、液氮罐、無菌培養液、培養瓶等，環境需要清潔無塵。
制備區——主要進行培養液及有關培養用的液體等的制備。
清洗和消毒滅菌區——清潔和消毒滅菌區應與其他區域分開，主要進行所有細胞培養器皿的清洗、準備、消毒及三蒸水制備等工作。
三、保衛細胞，橫掃污染源的7大戰場
2008年8月，《The Scientist》期刊發表了一篇題為 A case of mistaken identity 的文章，文中指出現已發表的 650 多項研究中所用的乳腺癌細胞可能并不是真正的乳腺癌細胞。
對于細胞培養實驗室來說，杜絕一切可能的污染源至關重要。
①細胞房入口：和緩沖間相連，緩沖間內備消毒服裝和鞋，口罩等，入內換上。進入后經過洗手-消毒—戴手套-再消毒。
②水浴鍋：對其進行定期消毒，也可以向水浴中加入適量的殺菌劑來抑制各種細菌、真菌的滋長。最好用恒溫孵育器代替水浴鍋，確保溫控精確性和均一性的同時也減少了污染的概率。
③顯微鏡：敞口放置培養皿或培養瓶。防止造成溶液飛濺，或觀察時污染物鏡，并進一步造成交叉污染。
④CO2 培養箱：對于日常使用來說，至少每月清潔培養箱一次。盡量減少門打開次數，避免對溫度、培養基中 pH 值調節的影響。
另外要特別注意，CO2培養箱不能直接放在地板上。
⑤生物安全柜：在開始實驗前，必須對超凈臺進行全面消毒，正確的做法是對整個機柜表面進行擦拭。還有一件事必不可少，那就是事先打開安全柜通風系統，流通空氣，直到原有的內部濁氣都被排出。
⑥離心機：和顯微鏡一樣，離心機也是交叉污染的重災區。平日里應保持離心機蓋關閉，拒污染于千里之外。離心機內部的小縫隙是藏污納垢之處，定期清潔轉子和腔室至關重要。
⑦窗戶 ：細胞房通常沒有窗戶，如果有窗，那么無論什么時段，窗戶都不允許打開。同時拉上窗簾，做好請勿開啟的警示標記。
四、珍愛生命，看好那個“液氮罐”
(-197°液氮柜）
1992年，一艘日本放在凍存船的液氮罐外膽破裂，導致原有的罐內9.3bar的正常壓力，瞬間變成了68.7bar。接著整條船炸了，方圓400米內的車和房子全部損毀，船被炸出了350米。
另外，液氮罐的作死方式不光是爆炸，還能很溫和。
那是爆炸的8年后，在愛丁堡的MRC西城醫院凍存細胞的實驗人員詹姆斯，由于液氮蓋子沒關導致的泄露，最終窒息死亡。
這并不是個例，類似的事故時有發生。因此工作人員在進行實驗室相關操作的時候，一定要實時控制好液氮柜。這既是對自己生命的負責，也是對他人生命的尊重。
五、找專業人，做專業事
建設一座功能完善的實驗室，要由專業的人員進行專業設計，要全面綜合考慮，遵循以人為本的原則，建成正規化、標準化的實驗室達到最佳的使用效果。
![雙[三(羥甲基)氨基甲烷],CAS:6976-37-0](http://struc.chem960.com/strucimg/7000/ctzw0nzi34oyob9fnlmhiwee.png)
