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油紅O染色液(培養細胞專用)操作步驟

2021-09-15 14:46 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
產品名稱:油紅O染色液(培養細胞專用)
英文名稱:Oil Red O stain kit(For Cultured Cells)
儲存條件:2-8℃,避光,有效期6個月
單位:瓶
規格:4*20ml 4*50ml

簡介:脂質(Lipid)是中性脂肪、類脂及其衍生物的總稱,其共同的物理特性是不溶于水,易溶于有機溶劑(如乙醇、乙醚等)。人體的脂肪主要有兩種:1、儲存脂肪,如中性脂肪,主要分布于皮下、腎、胰腺等部位。2、結構脂肪,如類脂(磷脂、糖脂、膽固醇等),主要分布于細胞內。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類,呈中性。中性脂肪是儲存能量的方式之一,在氧化時釋放出能量。中性脂肪染色經常采用蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ、蘇丹黑B、油紅O法等。傳統方法采用蘇丹染料,最近發現偶氮染料油紅O更適合脂肪的染色。油紅O是很強的脂溶劑和染脂劑,較易不甘油三脂結合呈小脂滴狀,不磷脂結合力稍差,其染色原理一般認為是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色。染料在細胞內脂質的溶解度較原溶劑中的溶解度更大,所以在染色時染料就從有機溶劑轉移入脂質而使脂肪染色。

油紅O染色液(細胞專用)簡稱ORO染色液,可顯示最小的脂滴,可優先為脂類從溶劑中吸附染料。標本不采用含有乙醇的固定液,如需要固定可采用10%福爾馬林)。脂肪陽性染色結果呈橘黃至紅色,但具體顏色因脂質濃度而定。

使用方法
1、培養好的細胞樣品固定于CellOROFixative15-25min。
2、PBS緩沖液或生理鹽水稍沖洗,稍晾干。
3、(可選)60%異丙醇滴洗20~30s。
4、滴加油紅O染色液,密閉染色10~15min。
5、分色:入60%異丙醇稍洗以便去除染液。
6、PBS緩沖液或生理鹽水稍沖洗。
7、入Mayer蘇木素染色液,復染核1~2min。
8、(可選)入OROBuffer1min。
9、晾干,鏡檢。

染色結果:
中性脂肪  橙紅色或橘紅色
細胞核   藍色

注意事項:
1、ORO染色液不夠穩定,易產生沉淀,不宜提前配制。
2、Mayer蘇木素染色液復染時間不能過長。
3、染色結果不能長期保存,應盡快觀察及照相。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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