劉氏染色液(Liu stain)使用說明書

品名：劉氏染色液
規格：3×100mL/3×500mL
保存：RT，避光保存。開封后請在6個月內使用完，每次用后應及時擰緊瓶蓋，以免揮發或變質。

試劑盒組成：

規格 名稱	3×100mL	3×500mL	Storage
試劑(A): Liu A Stain	100mL	500mL	RT，避光
試劑(B): Liu B Stain	2×100mL	2×500mL	RT，避光

產品介紹：
劉氏染色液是在Wright染色基礎上改良而來的一種快速染色方法，是細胞學檢查中常用的染色方法之一。該染色液是根據臺灣大學劉禎輝教授所研究的一種新的染色技術所配制，它與瑞氏染色(Wright Stain)一樣，都是利用Romanowsky Stain技術原理改良而來的，染色結果與瑞氏染色和迪夫快速染色也極其相似，但所需的時間比瑞氏染色要短，一般2min以內即可完成染色。劉氏染色液含1份劉氏A液、2份劉氏B液，分別用酸性染料(伊紅)和堿性染料(亞甲藍)等配制而成，主要用于血細胞涂片、骨髓涂片、陰道分泌物涂片、脫落細胞涂片等染色。

樣本要求：
1、    血細胞涂片染色：要求新鮮全血或EDTA·K2 抗凝血。
2、    陰道分泌物（婦科白帶）涂片染色：新鮮標本離開人體涂片后，需盡快以火焰或酒精固定，以避免細胞變形。
3、    骨髓涂片染色：涂片制成后，應在空氣中快速搖動或扇干，防止細胞皺縮變形或因空氣潮濕而溶血，絕對不能用高溫或火烤。
4、    脫落細胞涂片染色：采取檢體并涂片，待檢涂片固定可采用自然干燥法或濕片固定液固定法(具體操作可根據不同檢體及所采用的固定液所對應的規范操作要求進行)。一般情況下若采用濕片固定法，標本浸泡時間稍長些，效果會更佳。若采用濕片固定液固定標本，固定液用后需經常過濾，更換，防止細胞交叉污染。

檢驗方法：
一、標準方法
1、    加Liu A Solution(約0.5mL～0.8 mL)染色30 秒后。
2、    再將Liu B Solution 滴加于A 液上面(滴加之量為A 液的兩倍)。以嘴或洗耳球吹出微風，使液面產生漣漪狀，讓兩液充分混合，染色1 分30 秒～2 分鐘。
3、    水洗（沖洗時不能先倒掉染液，應以流水沖去，以防有沉渣沉淀在標本上），干燥、鏡檢。

二、快速染色
1、    加Liu A Solution(約0.5mL～0.8 mL)后，立即將Liu B Solution 滴加于A 液上面(滴加之量為A 液的兩倍)。以嘴或洗耳球吹出微風，使液面產生漣漪狀，讓兩液充分混合，染色30 秒～1 分鐘。
2、    水洗（沖洗時不能先倒掉染液，應以流水沖去，以防有沉渣沉淀在標本上），干燥、鏡檢。

檢驗結果：
血細胞涂片、骨髓涂片染色：紅細胞呈淡紅色，白細胞漿中顆粒清楚，并顯示出各種細胞特有的色彩，細胞核染紫紅色，核染色質結構清楚。
陰道分泌物（婦科白帶）染色：
①滴蟲：經過染色后的滴蟲跟活的滴蟲呈現完全不同的形態，一般情況下，看不到鞭毛。經過染色后，滴蟲多為梨形、圓形、橢圓形或呈不規則形態，漿被染成灰藍或天藍色，核小、棗核狀，常偏于一側，需注意觀察，避免與上皮細胞混淆。
②念珠菌（霉菌）：染成深藍色，可見芽生孢子，假菌絲細長而直。
③白細胞：形態上與血細胞涂片的白細胞相同，一般白細胞的多寡，提示發炎程度的高低，對醫師的診斷具有一定的指標作用。
④纖毛菌：細長如絲，灰藍色。
⑤淋菌：藍色，呈典型的腎形相對，多出現于白細胞、組織細胞內外。需注意女性陰道涂片常出現葡萄球菌，染色結果與淋菌相類似，也是一對一對的以雙球菌方式出現，所以對淋菌的判讀需十分謹慎，一般情況下，淋菌的發現多會伴隨大量白細胞的出現。本染色液對淋菌的判讀僅作為初檢染色參考結果，不作確診依據。
⑥加特納球桿菌：呈藍色、球桿狀。
脫落細胞染色：細胞核染紫紅色，核仁染藍色。細胞質隨著分化程序的不同，其嗜堿性程度也有變化，呈深淺不等的藍色。

注意事項：
1、供骨髓片染色使用時：①涂片要新鮮，涂片后立即進行染色，否則細胞蛋白質變性，染色偏堿。②載玻片要潔凈，手指不能觸及其表面。③不能用草酸鹽抗凝標本作涂片，因草酸鹽可使細胞核變形，染色質致密、胞漿空泡形成，出現草酸鹽結晶。④涂片一般不用抗凝劑，若作細胞計數或其他檢查，可考慮用肝素抗凝，但一般量不宜太大，否則會影響細胞形態。

供婦科白帶涂片及陰道\分泌物染色使用時：婦女白帶病是一種常見病，使用傳統鹽水涂片法只能查滴蟲和霉菌，而且檢出率偏低。本染色液可供婦科白帶涂片作為一種快速染色液進行多項檢查用，可在一片白帶涂片上同時作滴蟲、霉菌、白細胞、纖毛菌、淋菌、加特納球桿菌、核異質細胞、腫瘤細胞等多項初篩檢查，其方法簡便、時間較短、形態較清晰、檢出率較高，一般5 分鐘可出結果。

供脫落細胞使用時：
①脫落細胞的檢體來源較廣，這里所指包括子宮頸涂片、子宮內膜涂片、痰液涂片、支氣管洗液及拭擦物涂片，口腔食道涂片、胃液沖洗物涂片、尿液涂片、腹腔及胸腔滲出抽取液涂片等。脫落細胞臨床染色一般傳統的方法為巴氏染色或Hematoxylin-Eosin 染色。本染色液可作為快檢染色使用，其具有染色時間短，形態清晰等特點，其染色結果可當作臨床一個參考指標。
②細胞檢測之標本要能獲得有價值的診斷，標本中的細胞一定要盡量保持近于自然狀態，避免引起細胞變性。為達到此目的，欲獲得良好標本的第一步驟乃是迅速而適當的固定，如此可防止細胞變形或變性，保證染色效果的良好。

2、試劑貯存時，盡量避免高、低溫環境及陽光直射。

3、冬季室溫過低時，染色時間要適當延長。