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改良 Bielschowsky 神經染色液操作步驟

2023-06-12 16:15 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
改良 Bielschowsky 神經染色液
規格: 5×50ml
保存: 4℃ 避光,有效期3個月。
 
產品內容:
名稱 規格 Storage
試劑(A): Bielschowsky銀溶液 50ml 4℃ 避光
試劑(B): 還原劑 2×125ml RT
試劑(C): Bielschowsky氨銀溶液 50ml 4℃ 避光
試劑(D): 氯化金溶液 50ml 4℃ 避光
試劑(E): 海波溶液 50ml RT
 
 
產品說明:
神經組織主要是由具有長突起、能傳導沖動的神經細胞組成。神經細胞是神經系統的結構和功能單位,也稱神經元(Neuron)。神經元之間通過突觸互相聯系。神經元的胞突分為樹突與軸突兩種。每個神經元有 1 至多個樹突,軸突只有一個。
神經纖維由從神經元發出的軸突和較長的樹突以及包裹在外的構造一起組成。軸突中主要為神經原纖維和少量胞漿及線粒體,沒有尼氏小體。軸突外周的構造,有些較為復雜,外層被鞘膜包裹,稱為有髓纖維;有些比較簡單,無鞘膜被覆,稱為無髓纖維。
神經元和神經纖維的染色方法較多,但主要為鍍銀法。鍍銀法的基本原理是把固定后的組織或切片浸于銀溶液中,再用還原劑處理,使銀顆粒沉著于軸索的軸漿中,使之呈現深棕色或黑色。鍍銀后可在神經元胞漿內看到許多交錯成網的細絲,并伸入樹突及軸突之中。
Bielschowsky 銀染法是檢測神經纖維的一個非常有用方法。它可用于中樞神經系統的軸突、神經纖維和老年斑的染色。該方法簡便易行,常被用于阿爾茨海默癥的染色。
 
操作步驟(僅供參考):
1、 石蠟切片厚 8~15μm,脫蠟至水洗。
2、 蒸餾水洗 1~2min。
3、 于 37℃溫箱內入 Bielschowsky 銀溶液避光浸染 25~35 min。4、 蒸餾水洗 2~3min。
5、 用還原劑還原數秒,至切片呈現黃色為止。
6、 蒸餾水洗 3~5 min。
7、 用 Bielschowsky 氨銀溶液滴染 20~40s。
8、 傾去染液,直接用還原劑再次還原 1~2min,更換兩次溶液,使切片呈棕黃色。
9、 蒸餾水洗 3~5min。
10、 用氯化金溶液調色 3~5min。
11、 蒸餾水洗 1~2min。
12、 用海波溶液固定 3~5min。
13、 水洗 3~5min,然后用濾紙將切片周圍水分吸干。
14、 無水乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。
 
染色結果:神經元、軸突、神經纖維 深紫色至黑色
 
注意事項:
1、 所用的玻璃器皿要用酸洗,并用蒸餾水沖洗干凈,避免造成銀鏡反應。
2、 浸銀染色中過程中切片要注意展平避免皺褶,以免著色不均勻。
3、 建議每染色 10-15 張切片后更換新的染色液。
4、 切片染完后,裱片時要輕拿輕放,以免弄碎切片。
5、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
 
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